KU812 细胞
一般信息
| 说明 | KU812 细胞系是一种人类白血病细胞系,最初来源于一名处于爆发期的慢性髓性白血病(CML)患者。它的显著特点是能在特定条件下分化成嗜碱性和红细胞系,是研究造血分化和相关恶性肿瘤的重要工具。该细胞系具有嗜碱性前体的特征,包括存在甲苯胺蓝和星光蓝染色阳性的变色颗粒,并能合成组胺,表明具有嗜碱性活性。 KU812 细胞尤其适用于研究补体活化相关假性过敏(CARPA)和由嗜碱性粒细胞介导的超敏反应。这种作用源于它们对补体蛋白(如 C3a 和 C5a)的强烈反应,补体蛋白会引发组胺和其他炎症介质的释放,从而模拟假性过敏反应。KU812 细胞表达 CD63 和 CD203c 等细胞表面标记物,这些标记物与嗜碱性粒细胞活化和脱颗粒有关。这些标记已被用于基于流式细胞仪的方案中,以评估纳米药物和其他生物制剂的免疫兼容性。 此外,KU812 细胞在补充促红细胞生成素的条件下培养时具有红细胞分化潜能。这包括自发成熟为能够合成各种血红蛋白的红细胞,如成人型和胎儿型红细胞。这些特点突出了 KU812 在研究红细胞生成和嗜碱性粒细胞分化方面的实用性,使其成为血液学研究的多功能模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | 慢性骨髓性白血病,BCR-ABL1 阳性 |
| 同义词 | Ku812、KU-812、KU.812、KU 812 |
特点
| 年龄 | 38 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 日语 |
| 形态学 | 淋巴母细胞样 |
| 细胞类型 | 嗜碱性粒细胞祖细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | KU812(Cytion 目录编号 305306) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0379 |
生物分子数据
| 抗原表达 | CD3、安培(CD13) |
|---|---|
| 突变概况 | 突变:TP53,p.Lys132Arg (c.395A>G),同基因;基因融合:BCR-ABL,BCR 第 14 号外显子与 ABL1 第 2 号外显子融合(b3a2 转录本) |
| 核型 | 这些细胞至少含有一条 Ph1(费城)染色体。 |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS,并加入 2.5 g/L 葡萄糖和 10 mM HEPES |
| 亚培养 | 将悬浮细胞收集到 15 毫升试管中,用不含钙和镁的 PBS(T25 烧瓶用 3-5 毫升,T75 烧瓶用 5-10 毫升)轻轻清洗粘附的细胞。涂抹 Accutase(T25 烧瓶 1-2 毫升,T75 烧瓶 2.5 毫升),确保完全覆盖细胞层。让细胞在室温下孵育 10 分钟。孵育后,将悬浮细胞和粘附细胞混合并离心。离心后,小心重悬细胞团,并将细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 3 × 10⁵ 个细胞/毫升 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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