KC细胞
一般信息
| 说明 | KC(Kc167)是一种源自背侧闭合期雌性胚胎的果蝇(Drosophila melanogaster)胚胎细胞系,在Cellosaurus数据库中的注册编号为CVCL_Z833。 该细胞系最初由他人建立,并已被广泛应用于果蝇细胞生物学、基因筛选和功能基因组学研究。Kc167细胞经SV40病毒永生化处理,呈半贴壁生长,形成由贴壁细胞和松散漂浮细胞组成的混合群体。 它们是表征最充分的果蝇细胞系之一,完全适用于 RNAi 介导的基因沉默,因此成为无脊椎动物生物学中全基因组 RNAi 筛选的基石模型。 KC细胞适用于果蝇细胞生物学、全基因组RNAi和CRISPR筛选、信号转导通路研究(Wnt/Wingless、Hedgehog、Notch、JAK/STAT、Toll/NF-κB)、先天免疫研究以及进化保守通路的比较研究。 由于果蝇基因组已完成测序和注释,加之丰富的公开RNAi试剂数据库(如DRSC/TRiP),KC细胞在无偏见的功能基因组学探索中表现尤为出色。由于采用了SV40病毒进行永生化处理,该细胞系被归类为BSL-2级。 KC细胞在添加了2 mM谷氨酰胺和10% FBS的施耐德果蝇培养基中培养。关键点在于,果蝇细胞系在25°C、无CO₂的常压空气中培养(而非像哺乳动物细胞那样在37°C / 5% CO₂条件下培养)。 细胞通过轻柔重悬和稀释进行传代(半贴壁生长)。每 2–3 天更换一次培养基或对细胞进行稀释。 |
|---|---|
| 有机体 | 黑腹果蝇(果蝇) |
| 组织 | 胚胎 |
| 疾病 | 正常 |
| 转移部位 | 胚胎(背侧闭合期) |
| 应用 | 果蝇细胞生物学;全基因组RNAi筛选;CRISPR筛选;信号转导(Wnt/Wingless、Hedgehog、Notch、JAK/STAT、Toll/NF-κB);先天免疫;无脊椎动物功能基因组学 |
| 同义词 | KC,K C |
特点
| 年龄 | 背侧闭合阶段 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 半附着上皮样 |
| 细胞类型 | 胚胎细胞 |
| 生长特性 | 半附着 |
监管数据
| 引用 | KC(Cytion 产品编号 300604) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusAccession | CVCL_Z833 |
| 转基因生物现状 | GMO-S2:该果蝇细胞系含有一个稳定整合的SV40永生化 cassete。必须在BSL-2级生物安全实验室中进行操作。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 病毒易感性 | SV40 细胞永生化 |
|---|
处理
| 培养基 | 施耐德果蝇培养基 + 2mM 谷氨酰胺 + 10% 胎牛血清 (FBS)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中加入 2 mM 谷氨酰胺和 10% FBS |
| 解离试剂 | 无需处理(半附着;轻轻重悬) |
| 加倍时间 | 约24至48小时 |
| 亚培养 | 用移液管轻轻搅动培养液,使半贴壁细胞重新悬浮。 将适量培养液转移至新培养瓶中,加入新鲜的预热施耐德培养基。稀释至细胞密度为 5 × 10⁵ 至 1 × 10⁶ 个细胞/毫升。在 25°C 的常温空气中(无 CO₂)培养。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 5 × 10⁵ 至 1 × 10⁶ 个细胞/毫升 |
| 流体更新 | 每 2 至 3 天 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 25°C,环境空气(无需二氧化碳)。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |