K7M2 wt-Luc 细胞
一般信息
| 说明 | K7M2 wt-Luc 是小鼠 K7M2 骨肉瘤细胞系的生物发光衍生物,经过基因工程改造,可稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因。 亲本 K7M2 细胞系是从 BALB/c 小鼠自发性骨肉瘤的腹水中建立的,其特征为成骨细胞样形态和较高的转移潜力,尤其是向肺部的转移。 K7M2 是 BALB/c 背景中为数不多的同基因骨肉瘤模型之一,因此成为研究骨肉瘤生物学、肿瘤与免疫相互作用以及在免疫功能正常的宿主中评估免疫治疗策略的宝贵工具。 K7M2 wt-Luc 中稳定的荧光素酶整合,使得在同基因 BALB/c 小鼠中对原发肿瘤的生长和肺转移扩散进行灵敏、无创的生物发光成像 (BLI) 成为可能。 在给药荧光素底物后,发出的信号与存活肿瘤细胞数量呈正相关,从而支持对肿瘤植入、转移定植和治疗反应进行纵向监测,而无需在每个时间点进行侵入性操作。 这使得 K7M2 wt-Luc 特别适合用于评估骨肉瘤中抗肿瘤和抗转移药物、检查点抑制剂以及联合治疗策略的临床前研究。 K7M2 wt-Luc 保留了亲本 K7M2 系的生物学和免疫学特性,包括补体成分 C3 和 Fc γ 受体 I (FcgRI) 的表达,这些特征可能会影响与先天免疫系统的相互作用。该荧光素酶报告基因大大提高了实验的灵活性和灵敏度,可实时追踪肿瘤进展。 研究人员在进行大规模体内实验前,应根据其具体的实验条件,对荧光素酶活性、生长动力学及转移行为进行验证。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 腹水 |
| 疾病 | 小鼠骨肉瘤 |
| 转移部位 | 肺部 |
| 应用 | 骨肉瘤研究;同基因型BALB/c肿瘤模型;基于生物发光技术的肺转移成像;抗肿瘤和抗转移药物评价;免疫检查点抑制剂检测;先天免疫相互作用研究(C3、FcgRI);小儿骨癌免疫治疗 |
| 同义词 | K7M2-WT, K7M2 |
特点
| 品种/亚种 | BALB/c |
|---|---|
| 年龄 | 895 天 |
| 性别 | 女性 |
| 细胞类型 | 成骨细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | K7M2 wt-Luc(Cytion 产品编号 305684) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | 未分配(K7M2 wt-Luc报告基因衍生物;亲本K7M2同系BALB/c骨肉瘤) |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该细胞系含有通过复制缺陷型慢病毒转导引入的、稳定整合的萤火虫荧光素酶报告基因盒(Luc2,经密码子优化)。 由此获得的多克隆细胞群在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选条件下维持。需采用S1级生物安全防护措施。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表达的受体 | 补体(C3),表达,Fc 受体,IgG,高亲和力 I(Fcgr1),表达 |
|---|---|
| 抗原表达 | Luc2(萤火虫,密码子优化版) |
| 致肿瘤性 | 是 |
处理
| 培养基 | DMEM |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 转移部位: | 肺部 |
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