IEC-18 细胞
一般信息
| 说明 | IEC-18 细胞系是一种非转化上皮细胞系,来源于大鼠小肠的隐窝细胞。这些细胞已被证明能有效模拟小肠上皮细胞的生理特性,尤其是氯离子(Cl-)的转运。IEC-18 细胞中的氯离子通道表现出不同类型的传导,可对细胞肿胀、细胞内钙(Ca²⁺)增加和环磷酸腺苷(cAMP)升高等各种刺激做出反应。例如,IEC-18 细胞中膨胀激活的 Cl- 电流具有外向整流和电压无关的特点。此外,IEC-18 细胞还表达囊性纤维化跨膜传导调节器(CFTR)通道,这体现在细胞中存在 cAMP 激活的 Cl- 传导,格列本脲和 5-硝基-2-(3-苯基丙基氨基)苯甲酸(NPPB)可抑制这种传导,但 DIDS 不会影响这种传导。 IEC-18 细胞还被用于探索脱落诱导应激(即 anoikis)下的细胞存活机制。研究表明,前列腺素 E2(PGE2)可通过 cAMP 介导的信号通路促进脱落的 IEC-18 细胞的存活和聚集。这种保护作用与腺苷酸环化酶和蛋白激酶 A(PKA)的激活有关,即使在悬浮状态下也能增强细胞的粘附性和活力。这些发现对于了解炎症相关过程和肠道组织中潜在的致癌因素具有重要意义。 此外,IEC-18 单层细胞还被用来研究各种分子通过肠道屏障的转运。与 Caco-2 细胞系相比,IEC-18 细胞在结构上与小肠隐窝细胞相似,因此为被动跨细胞和旁细胞转运提供了更准确的模型。与具有显著主动转运能力的 Caco-2 细胞不同,IEC-18 细胞显示出最小的载体介导转运能力,因此更适合用于分析亲水性大分子的被动渗透性。 |
|---|---|
| 有机体 | 老鼠 |
| 组织 | 小肠,回肠 |
| 疾病 | 正常 |
| 同义词 | IEC 18,IEC18,第 18 号肠上皮细胞系 |
特点
| 品种/亚种 | Charles River Sprague Dawley (CD(SD)) |
|---|---|
| 年龄 | 18-24 天 |
| 性别 | 未说明 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | IEC-18(Cytion 目录编号 305302) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0342 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 2 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305302-301024 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305302 |