Hep-56.1C 细胞
一般信息
| 说明 | Hep-56.1c 肝癌细胞系来源于小鼠肝肿瘤,特别是 C57BL/6J 小鼠品系。该细胞系的特点是在体外繁殖的不同阶段发现了 p53 基因的显著突变。具体来说,Hep-56.1c 在外显子 5 的密码子 132 处出现了 C:G 到 G:C 的转换,导致氨基酸从半胱氨酸变为色氨酸。这种突变在第 17 代时被检测到,这表明该突变具有选择性生长优势,导致其在细胞群中占主导地位。 Hep-56.1c 细胞系主要呈上皮细胞形态,反映了其肝细胞来源。这与其中间丝蛋白特征一致,其中包括简单角蛋白 K8 和 K18,以及不同程度的波形蛋白和角蛋白 K19。这些蛋白的存在证实了该细胞系的肝细胞性质,并将其归类为肝癌细胞系。 使用 DNA 指纹图谱对 Hep-56.1c 进行进一步分析后发现,虽然随着细胞通过数的增加,特定条带的相对强度发生了一些变化,但并没有发现任何重大的结构异常。这表明基因组在长时间培养后具有一定程度的稳定性和可变性。p53 突变分析和中间丝蛋白表达模式共同确立了 Hep-56.1c 作为研究肝细胞癌和 p53 突变在肝脏肿瘤发生中的作用的宝贵模型的地位。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 肝脏 |
| 疾病 | 肝细胞癌 |
| 同义词 | HEP-56.1C、56.1C、56.1c |
特点
| 品种/亚种 | C57BL/6J |
|---|---|
| 年龄 | 成人 |
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Hep-56.1C(Cytion 目录编号 400203) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5768 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每 3 至 5 天 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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