Hep-56.1B 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$650.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 400102

安全数据表

产品介绍

说明	Hep-70.4 肝瘤细胞系来源于小鼠肝脏肿瘤，特别是 C57BL/6J 小鼠品系。该细胞系的显著特点是其 p53 基因发生了突变，这些突变是在体外繁殖的不同阶段发现的。第 8 个周期时，在单链构象多态性（SSCP）分析中检测到一个微弱的附加信号，表明存在 p53 突变。到了第 38 期，发现了两个不同的 p53 点突变：第 5 外显子第 135 密码子处的 G:C 到 C:G 的转换和第 138 密码子处的 C:G 到 G:C 的转换。这些突变分别导致氨基酸从丙氨酸变为脯氨酸，半胱氨酸变为色氨酸。 Hep-70.4 细胞系在繁殖过程中表现出明显不同的形态表型。一些亚系表现出上皮形态，而另一些则表现出成纤维细胞样外观。这种异质性反映了细胞系的复杂性及其在不同培养条件下的适应性。早期传代中既存在正常的 p53 等位基因，也存在突变的 p53 等位基因，这表明突变赋予了细胞选择性生长优势，从而导致突变克隆逐渐占优势。对 Hep-70.4 细胞系的中间丝蛋白分析表明，正常肝细胞中典型的简单角蛋白 K8 和 K18 以及波形蛋白和角蛋白 K19 都有不同程度的表达。这些蛋白模式证实了该细胞系来源于肝细胞，并将其归类为肝癌细胞系。通过 DNA 指纹分析进一步评估了 Hep-70.4 的基因组稳定性，尽管随着通过数的增加，某些条带的相对强度发生了变化，但没有发现任何重大的结构异常。
有机体	鼠标
组织	肝脏
疾病	肝细胞癌
同义词	HEP-56.1B、56.1B、56.1b

品种/亚种	C57BL/6J
年龄	成人
性别	女性
形态学	上皮样
生长特性	附着物

引用	Hep-56.1B（Cytion 目录编号 400202）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_5767

蛋白质表达	角蛋白 8、角蛋白 18 和波形蛋白。
致肿瘤性	是，在 C57BL/6J 小鼠中
突变概况	P53mut（外显子 8 中的密码子 277 => Arginin -- Threonin）。

培养基	DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
播种密度	1 × 10^⁴ 个细胞/^平方厘米
流体更新	每 3 至 5 天
解冻后恢复	解冻后，将细胞以5×10^⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

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Hep-56.1B 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA