HeLa EB3 GFP KIRC14 细胞
一般信息
| 说明 | HeLa EB3-GFP Kirc 14 是人类 HeLa 宫颈癌细胞系的基因改造衍生物,经过工程改造可稳定表达一个带有 GFP 标签的 EB3(末端结合蛋白 3)融合构建体,其中 其中“Kirc 14”指从转染细胞池中筛选出的特定亚克隆(克隆14)。EB3是末端结合蛋白家族的成员,能够追踪生长中的微管正端,并作为活细胞中微管动态行为的报告蛋白。 GFP-EB3融合蛋白在聚合中的微管尖端产生特征性的彗星状荧光信号,从而能够对微管动力学、细胞内运输以及细胞骨架的组织结构进行实时活细胞成像。 HeLa EB3-GFP Kirc 14 用于细胞生物学研究,可对微管正端动力学进行活细胞成像,研究有丝分裂纺锤体组装和着丝点-微管相互作用,探究细胞内货物运输,并评估影响微管聚合动力学的化合物。 稳定的GFP-EB3亚克隆表达可在多次传代过程中保持一致的荧光强度和分布模式,因此第14号克隆适用于定量成像实验以及微管靶向药物的快速筛选。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 子宫颈 |
| 疾病 | 宫颈腺癌(HeLa背景);稳定转染了GFP-EB3(微管正端报告基因) |
| 应用 | 活细胞微管动力学成像;有丝分裂纺锤体研究;着丝粒-微管相互作用研究;细胞内运输;微管靶向药物筛选 |
特点
| 形态学 | 上皮样 |
|---|---|
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HeLa EB3-GFP Kirc 14 2024年9月27日(Cytion 产品编号 305718) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | 源自HeLa(CVCL_0030);GFP-EB3亚克隆未单独编号 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HeLa EB3 GFP KIRC14细胞系含有一个带有GFP标签的EB3构建体,用于活细胞成像中的微管正端追踪。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase,10分钟,37°C |
| 加倍时间 | 约24小时 |
| 亚培养 | 从贴壁细胞中移除旧培养基,并用PBS洗涤。加入Accutase,室温孵育8-10分钟,用培养基重悬细胞,以300×g离心3分钟,然后转移至装有筛选培养基的新培养瓶中。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 1 至 3 × 10⁴ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305718-260526 | 分析证书 | 13. Jul. 2026 | 305718 |