HaCaT-ras II-4 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$550.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300495

安全数据表

产品介绍

说明	HaCaT-ras II-4 细胞是生物科学中一个引人注目并被广泛研究的细胞模型。这些细胞来源于自发永生化的人类皮肤角质细胞（即 HaCaT 细胞），通过转染 c-Ha-ras （EJ）癌基因对其进行改造。正如 Boukamp 等人在 1990 年进行的综合研究中所描述的，这些细胞的选择是基于它们对 G418（一种选择性抗生素）的抗性。 HaCaT-ras II-4 细胞的一个显著特点是其致瘤性。当把这些克隆细胞注射到 Balb/c-nu/nu 小鼠体内时，它们会形成高度分化的局部浸润性鳞状细胞癌，表现出令人着迷的行为。这种独特的特性使研究人员能够在受控的实验环境中探索肿瘤发生和发展的机制。 HaCaT-ras II-4 细胞主要来自白种人，确保了科学研究与特定种族群体的相关性。它们的来源和特点使其成为有兴趣研究各种皮肤生物学和分化问题的研究人员的宝贵资源。在典型的培养条件下，这些细胞具有部分到完全分化的表型。这种表型是由于传统培养基和胎牛血清中含有大量的钙，为细胞提供了理想的环境，使其表现出与成熟皮肤细胞相似的特征。研究人员可利用这一特点研究皮肤发育、伤口愈合和表皮分化的复杂过程。 HaCaT-ras II-4 细胞具有致肿瘤性，能在体外复制皮肤生物学特性，为探索与皮肤癌和其他皮肤相关疾病有关的分子途径提供了独特的机会。通过利用这种特殊的细胞模型，研究人员可以更深入地了解肿瘤发生、侵袭潜力和治疗干预的内在机制。 HaCaT-ras II-4 细胞是生物科学研究，特别是皮肤生物学和分化研究的重要工具。HaCaT-ras II-4 细胞来源于自发永生化的人类皮肤角质细胞，经 c-Ha-ras (EJ) 癌基因修饰，随后在小鼠体内产生致瘤行为，这使它们成为研究皮肤相关疾病和治疗方法的宝贵工具。通过利用 HaCaT-ras II-4 细胞的独特特性，研究人员可以更深入地了解皮肤生物学，并促进医学知识的发展和各种皮肤疾病的治疗方案。
有机体	人类
组织	皮肤
同义词	HaCaT-ras 克隆 II-4、HaCaT II-4、II-4

年龄	62 岁
性别	男
种族	高加索人
细胞类型	角质细胞
生长特性	附着物

引用	HaCaT-ras II-4（Cytion 目录号 300495）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_3868
转基因生物现状	GMO-S1：这种人类角质形成细胞系（HaCaT-ras II-4）含有通过转染引入的编码 c-Ha-Ras 癌基因序列的质粒，可实现转化生长行为。该构建体被整合到 HaCaT 衍生的角质形成细胞中。此分类仅适用于德国国内，其他地区可能有所不同。

蛋白质表达	P53（+），CEA（+）、
致肿瘤性	在 Balb/c-nu/nu 小鼠体内形成高分化、局部浸润性鳞状细胞癌。
核型	非整倍体（低四倍体）

培养基	DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS
解离试剂	每次分离细胞前，必须使用不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 PBS 制备 EDTA（0.05%）和胰蛋白酶（0.1%）的 1:1 混合物，以提供生理渗透压。不建议使用即用型胰蛋白酶/EDTA 混合物，因为这可能导致细胞结块。可使用 TrypLETM Express（Life Technologies 公司）代替胰蛋白酶/EDTA。应遵循制造商的操作规程。
亚培养	丢弃旧培养基：去除烧瓶中的旧培养基。洗涤细胞：在 T25 烧瓶中加入 3-5 毫升 PBS（不含钙和镁），或在 T75 烧瓶中加入 5-10 毫升 PBS（不含钙和镁），以清洗粘附的细胞。加入 EDTA 溶液：用新配制的 0.05% EDTA 溶液完全覆盖细胞层--T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。培养：在 37 摄氏度下培养 10 分钟。加入胰蛋白酶/EDTA 溶液：培养结束后，向烧瓶中加入新配制的胰蛋白酶/EDTA 溶液（0.05% 胰蛋白酶，0.025% EDTA），确保细胞被完全覆盖--T25 烧瓶用 1 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。监测脱落：观察细胞，细胞应在 1-2 分钟内脱离。中和胰蛋白酶：加入含 FBS 的细胞培养基以阻止胰蛋白酶的活性。转移细胞：将细胞悬液分装到预先注入新鲜培养基的新烧瓶中。
播种密度	1 × 10^⁴ 个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

由 Bioz 提供查看有关 Bioz 的更多详情

HaCaT-ras II-4 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制与分子分析