HaCaT-ras A5 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$550.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300494

安全数据表

产品介绍

说明	HaCaT-ras A5 细胞是一种自发永生、不致癌的人类皮肤角质形成细胞系，在研究肿瘤微环境相互作用和皮肤癌进展方面发挥着重要作用。这些细胞源自一名 62 岁的高加索男性，经过克隆选择和诱变，再加上自分泌生长因子的调节，能在 Balb/c-nu/nu 小鼠体内形成生长缓慢、高度分化的良性囊肿。这使它们成为研究体内肿瘤进展的细胞动力学和分子机制的宝贵模型。 HaCaT-ras A5 细胞尤其有助于阐明肿瘤细胞与周围基质细胞（包括成纤维细胞、免疫细胞和内皮细胞）之间复杂的相互作用。这些相互作用是由生长因子、细胞因子和蛋白酶等各种信号分子的分泌介导的，其中白细胞介素-6（IL-6）起着至关重要的作用。众所周知，IL-6 在许多癌症类型中会失调，主要是通过 STAT3 转录因子的过度表达或持续激活。研究表明，IL-6 对 HaCaT-ras A5 细胞的刺激会通过 JAK/STAT 信号通路显著增加其增殖，而成纤维细胞则不受影响，因为该通路的负调控因子 SOCS3 对其抑制作用更强。描述 STAT3 和 SOCS3 动态的数学模型捕捉到了这种不同的反应，从而加深了对细胞特异性信号级联的理解。此外，IL-6 不仅直接影响 HaCaT-ras A5 细胞的增殖，还通过激活 HGF、KGF、VEGF 和 IL-8 等生长因子网络间接影响细胞环境。涉及 16,000 多个基因的基因表达分析表明，IL-6 刺激会上调 HaCaT-ras A5 细胞和成纤维细胞中与干扰素信号通路相关的 19 个基因，这与观察到的成纤维细胞生长抑制相关。通过 siRNA 敲除实验证实了 SerpinB4 在 HaCaT-ras A5 细胞增殖中的关键作用，这一发现强调了 IL-6 在肿瘤细胞和基质细胞中错综复杂的调控作用。对IL-6作用的全面了解增强了开发旨在调节肿瘤微环境中IL-6信号通路的靶向治疗策略的潜力。总之，HaCaT-ras A5 细胞为探索肿瘤微环境中复杂的相互作用提供了一个强大的模型，为癌症研究和治疗开发的新方法铺平了道路。
有机体	人类
组织	皮肤
同义词	HaCaT-ras 克隆 A-5、HaCaT A-5、A-5、A5

年龄	62 岁
性别	男
种族	高加索人
细胞类型	角质细胞
生长特性	附着物

引用	HaCaT-ras A5（Cytion 目录号 300494）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_xK16
转基因生物现状	GMO-S1：HaCaT-ras A5品系含有质粒携带的c-Ha-ras癌基因构建体，用于上皮转化研究。此分类仅适用于德国境内，其他地方可能有所不同。

蛋白质表达	P53（+），CEA（+）、
致肿瘤性	Balb/c-nu/nu 小鼠良性肿瘤的形成。
核型	非整倍体（低四倍体）

培养基	DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS
解离试剂	每次分离细胞前，必须使用不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 PBS 制备 EDTA（0.05%）和胰蛋白酶（0.1%）的 1:1 混合物，以提供生理渗透压。不建议使用即用型胰蛋白酶/EDTA 混合物，因为这可能导致细胞结块。可使用 TrypLETM Express（Life Technologies 公司）代替胰蛋白酶/EDTA。应遵循制造商的操作规程。
亚培养	丢弃旧培养基：去除烧瓶中的旧培养基。洗涤细胞：在 T25 烧瓶中加入 3-5 毫升 PBS（不含钙和镁），或在 T75 烧瓶中加入 5-10 毫升 PBS（不含钙和镁），以清洗粘附的细胞。加入 EDTA 溶液：用新配制的 0.05% EDTA 溶液完全覆盖细胞层--T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。培养：在 37 摄氏度下培养 10 分钟。加入胰蛋白酶/EDTA 溶液：培养结束后，向烧瓶中加入新配制的胰蛋白酶/EDTA 溶液（0.05% 胰蛋白酶，0.025% EDTA），确保细胞被完全覆盖--T25 烧瓶用 1 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。监测脱落：观察细胞，细胞应在 1-2 分钟内脱离。中和胰蛋白酶：加入含 FBS 的细胞培养基以阻止胰蛋白酶的活性。转移细胞：将细胞悬液分装到预先注入新鲜培养基的新烧瓶中。
播种密度	1 × 10^⁴ 个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
HLA 等位基因	A: '31:01:02 B: '40:01:02, '51:01:01 C: '03:04:01, '15:02:01 DRB1: '04:01:01, '15:01:01G DQA1: '01:02:01, '03:03:01 DQB1: '03:01:01, '06:02:01 DPB1*: '03:01:01G、'04:01:01G E: '01:03:01, '01:03:02

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HaCaT-ras A5 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA