HT55 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$430.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 305018

安全数据表

产品介绍

说明	HT55 是一株源自一名 54 岁白人女性原发性直肠肿瘤的人直肠腺癌细胞系。该细胞系呈粘附性单层生长，具有上皮样形态，并在 Cellosaurus 数据库中注册为 CVCL_1294。 HT55 携带 APC（结肠腺瘤性息肉病）抑癌基因中的多个杂合子和纯合子失活突变，包括 p.Gln1131Ter、p.Gln1303Ter、p.Arg1463Ser、 p.Asn581Tyr 和 p.Lys241Ter（均为杂合突变），以及一个纯合的 p.Arg213Leu 替换突变。这种突变谱使HT55成为APC驱动的结直肠癌发生生物学相关模型，反映了驱动大多数人类结直肠癌的经典WNT通路失调。 HT55在结直肠癌研究中被广泛用于WNT/β-catenin信号传导、APC肿瘤抑制功能、药物敏感性和耐药性研究，以及针对WNT通路组分的靶向药物的临床前评估。该细胞系适用于体外药理学检测和免疫缺陷小鼠模型中的异种移植研究，为机制和转化性结直肠癌研究提供了一个附着性良好、易于操作的体外平台。由于存在多种 APC 截短突变，HT55 代表了通常由 APC 功能丧失驱动的微卫星稳定、染色体不稳定的结直肠癌亚型。 HT55 细胞系在 EMEM 培养基（MEM Eagle，含 2 mM L-谷氨酰胺、2.2 g/L NaHCO₃、EBSS； Cytion货号 820100a）培养基中，并补充 10% FBS，于 37°C、含 5% CO₂ 的加湿环境中培养。当细胞汇合度达到约80–90%时，使用Accutase进行传代，推荐的分裂比例为1:3至1:5，接种密度为1–3 × 10⁴个细胞/cm²。每2–3天更换一次培养基。细胞倍增时间约为28小时。
有机体	人类
组织	直肠
疾病	腺癌
应用	结直肠癌研究；WNT/APC通路研究；药物敏感性与耐药性检测；肿瘤学临床前研究；异种移植模型；靶向治疗评估
同义词	HT55

年龄	54 年
性别	女性
种族	高加索人
形态学	上皮样
细胞类型	上皮细胞
生长特性	附着物

引用	HT55（Cytion 产品编号 305018）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

突变概况	突变：p.Gln1131Ter，杂合子；突变：p.Gln1303Ter，杂合子；突变：p.Arg1463Ser，杂合子；突变：p.Asn581Tyr，杂合子；突变：p.Lys241Ter，杂合子；突变：p.Arg213Leu，纯合子

培养基	EMEM（MEM Eagle），w：2 mM L-谷氨酰胺，w：2.2 g/L NaHCO3，w：EBSS（Cytion 文章编号 820100a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS
解离试剂	Accutase
加倍时间	28 小时
亚培养	从贴壁细胞中移除旧培养基，并用不含钙和镁的PBS洗涤细胞。对于T25培养瓶，使用3-5毫升PBS；对于T75培养瓶，使用5-10毫升。随后，用Accutase完全覆盖细胞，T25培养瓶用量为1-2毫升，T75培养瓶用量为2.5毫升。将细胞在室温下孵育8-10分钟以使其脱落。孵育结束后，加入10毫升培养基轻轻混匀细胞使其重新悬浮，然后以300×g离心3分钟。弃去上清液，将细胞用新鲜培养基重新悬浮，并转移至已装有新鲜培养基的新培养瓶中。
分割比率	1 到 5
播种密度	1至3×10^⁴个细胞/^平方厘米
流体更新	每 2 至 3 天
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

HT55 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制与分子分析