HT-29 MTX E12 细胞
一般信息
| 说明 | HT-29-MTX-E12是一种从人类结直肠腺癌细胞系HT29通过甲氨蝶呤(MTX)筛选得到的类似于腺泡细胞的亚克隆,MTX能诱导细胞向分泌粘液的表型分化。在从 HT29-MTX 培育出的几个亚克隆中,E12 亚克隆脱颖而出,因为它能牢固地形成具有紧密连接的汇合单层,而且顶端表面的粘液层非常厚且连续。阿尔新蓝(Alcian Blue)染色、透射电子显微镜(TEM)以及粘蛋白基因 MUC1 和 MUC2 的表达都表明,该亚克隆具有较高比例的成熟鹅口疮细胞。事实上,与其他亚克隆和母体HT29细胞相比,HT-29-MTX-E12的MUC1和MUC2 mRNA水平要高得多,这与粘液厚度约为142 ± 51 µm(与体内肠道环境相当)相关。 在功能上,HT-29-MTX-E12 已被证明可模拟人类肠道粘液层的屏障特性,尤其是在评估亲脂性药物的吸收方面。与不含粘液的 Caco-2 细胞相比,厚粘液屏障的存在大大降低了睾酮和各种巴比妥酸盐等亲脂性化合物的表观渗透系数(Papp)。例如,睾酮在 HT-29-MTX-E12 细胞中的 Papp 降低了 43%,这突出表明了粘液对药物扩散的影响。尽管HT-29-MTX-E12的上皮屏障比Caco-2细胞更易渗漏,但它的粘液生成能力使其保持了生理相关性,成为研究肠道药物吸收和粘液对渗透性影响的宝贵体外模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 结肠 |
| 疾病 | 结肠腺癌 |
| 同义词 | HT29-MTX-E12、MTX-E12 |
特点
| 年龄 | 44 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HT-29-MTX-E12(Cytion 目录编号 305801) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_G356 |
生物分子数据
| 突变概况 | 突变:突变,APC,简单,p.Glu853Ter (c.2557G>T),杂合子(来自母细胞系).突变,APC,简单,p.Thr1556Asnfs*3 (c.4666dupA) (c.4666_4667insA),杂合子(来自母细胞系).突变,BRAF,简单,p.Val600Glu (c.1799突变,PIK3CA,简单,p.Pro449Thr (c.1345C>A),杂合子(来自母本细胞系).突变,SMAD4,简单,p.Gln311Ter (c.931C>T)突变,TP53,简单,p.Arg273His (c.818G>A),杂合子(来自母细胞系)。 |
|---|
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305801-151225 | 分析证书 | 11. Feb. 2026 | 305801 |
| 305801-221225 | 分析证书 | 11. Feb. 2026 | 305801 |
| 305801-291225 | 分析证书 | 11. Feb. 2026 | 305801 |