HSF (SV40) 细胞
一般信息
| 说明 | HSF(SV40)永生化细胞系是指经过基因改造的细胞,这些细胞表达能促进细胞永生化的 Simian Virus 40 (SV40) 大 T 抗原 (T-Ag)。SV40 T-Ag 是一种强效的肿瘤蛋白,能与 p53 和视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)等重要的肿瘤抑制蛋白相互作用,导致其抑制肿瘤的功能失活。这种相互作用破坏了正常的细胞周期控制机制,使细胞得以绕过衰老,无限增殖。 由于 HSF(SV40)细胞具有永生的特性,而且 SV40 T-Ag 在其转化过程中起着关键作用,因此被广泛用于癌症研究,特别是与病毒致癌、细胞周期调控以及针对分子伴侣和肿瘤抑制途径的治疗干预相关的研究。它们的使用为了解病毒癌蛋白与宿主细胞调控网络之间的相互作用提供了宝贵的见解,为开发癌症靶向疗法铺平了道路。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 转移部位 | 不适用(正常脾脏成纤维细胞;SV40永生化) |
| 应用 | SV40致癌作用;p53/Rb肿瘤抑制基因生物学;细胞周期调控;成纤维细胞生物学;癌症生物学 |
特点
| 形态学 | 纤维母细胞样 |
|---|---|
| 细胞类型 | 人脾脏成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HSF(SV40)(Cytion 目录号 305338) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | 未分配 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该 HSF 成纤维细胞系含有 SV40 T 抗原构建体,可用于皮肤和结缔组织研究的永生化。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、50 微克/毫升抗坏血酸 |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 约24至36小时 |
| 亚培养 | 用PBS洗涤,加入Accutase(室温下孵育8–10分钟),重新悬浮,以300×g离心3分钟,然后重新接种。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1 至 3 × 10⁴ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305338-271224 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305338 |