HROHep03 细胞
一般信息
| 说明 | HROHep03 是一株源自 71 岁白人女性患者原发性肝肿瘤的人类肝细胞腺癌细胞系,隶属于 PD Dr. Michael Linnebacher 自 2006 年起开发的 HRO 生物样本库系列中的患者来源肿瘤细胞系。 该肿瘤被归类为原发性腺癌,TNM分期为T0NxMx,分级为3级,表明这是一种高分化肝腺癌,且在组织采集时未确认存在远处转移。 HROHep03以贴壁单层形式增殖,具有成纤维细胞样形态,经确认不含人类致病病毒(HBV、HCV和HIV),符合林内巴赫生物样本库系列的严格质量控制标准。该细胞株在Cellosaurus数据库中的登录号为CVCL_2U72。 HROHep03 适用于肝细胞腺癌研究、高分化肝肿瘤细胞生物学研究、药物敏感性与耐药性检测(索拉非尼、顺铂、5-氟尿嘧啶)、肝肿瘤侵袭与迁移实验,以及分子通路分析。 作为 HRO 生物样本库的一部分,该细胞系提供了一种患者特异性生物资源,可与来自同一患者的匹配免疫学材料配对,用于个性化肿瘤学研究。 其成纤维细胞样形态在表型上区别于更常见的肝细胞样 HCC 细胞系,这可能反映了肿瘤进展或体外适应过程中获得的上皮-间质转化特征。 HROHep03 以贴壁培养方式在 DMEM:Ham’s F12(1:1)培养基中维持,该培养基中添加了 10% FBS,培养条件为 37°C、加湿的 5% CO₂ 环境。当细胞汇合度达到约 80–90% 时,使用 Accutase 进行传代。 每3–5天更换一次培养基;解冻后,需等待至少2天让细胞恢复,再进行首次换液。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肝脏 |
| 疾病 | 原发性腺癌,T0NxMx 分期,3 级 |
| 转移部位 | 不适用(TNM分期为T0NxMx;取样时未确诊远处转移) |
| 应用 | 肝细胞腺癌研究;高分化肝细胞癌(HCC)建模;药物敏感性测试(索拉非尼、顺铂、5-氟尿嘧啶);肝肿瘤侵袭与迁移;与患者匹配的人源性组织资源库(HRO)研究 |
特点
| 年龄 | 71 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 纤维母细胞样 |
| 细胞类型 | 成纤维细胞样(肝细胞癌) |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HROHep03(Cytion 目录号 300197) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_2U72 |
| 转基因生物现状 | 未经基因改造;由PD Dr. Linnebacher建立的、源自患者的野生型肝腺癌细胞系。经确认不含HBV、HCV和HIV。 |
生物分子数据
| 病毒 | 不含人类致病病毒 HBV、HCV 和 HIV。 |
|---|
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 约48至72小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 2 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每 3 至 5 天 |
| 解冻后恢复 | 2 天 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300197-117 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300197 |
| 300197-219 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300197 |