HROG33 T0 M1 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300878

安全数据表

产品介绍

说明	HROG33 T0 M1系由一名成年女性患者新鲜切除的肿瘤组织建立的人源原发性多形性胶质母细胞瘤（GBM）细胞系，该患者患有WHO IV级胶质母细胞瘤，肿瘤位于左侧枕颞部区域。其中"T0"代表初诊时的原发肿瘤，"M1"则指由此标本衍生的对应体外模型。该细胞系的建立是系统性努力的一部分，旨在从新鲜及冷冻保存的肿瘤材料中建立超低代次胶质母细胞瘤培养体系，以保留患者特异性的分子与功能特征。 HROG33 T0 M1细胞表现为贴壁生长，具有原发性胶质母细胞瘤培养物典型的成纤维细胞样形态。细胞形成单层结构，并在体外展现出稳定的增殖能力。在对照建立研究中，新鲜与冷冻保存肿瘤组织衍生的配对培养物在形态、生长动力学及药物反应性方面均无显著差异。代表性HROG细胞系的免疫表型特征显示，其表达神经谱系相关标记物（包括胶质纤维酸性蛋白GFAP、神经元粘蛋白nestin及波形蛋白vimentin），符合胶质瘤衍生的表型特征。对HROG系列进行的分子分析包括MGMT启动子甲基化、EGFR扩增以及TP53、IDH1/2、KRAS和BRAF突变状态的评估，证实建立的培养体系保留了肿瘤特异性基因组特征。功能层面，已评估HROG衍生的细胞系对胶质母细胞瘤治疗中标准疗法及研究性药物的敏感性，包括替莫唑胺、卡莫司汀（BCNU）、长春新碱和伊马替尼。配对细胞系的药物反应谱表明，经组织冷冻保存后仍保持稳定且可重复的药理学行为。作为超低代次原代胶质母细胞瘤模型，HROG33 T0 M1为研究胶质母细胞瘤生物学特性、预测治疗反应及患者特异性肿瘤异质性提供了临床相关的体外系统，同时最大限度减少了长期连续细胞系适应性相关的伪影。
有机体	人类
组织	大脑
疾病	胶质母细胞瘤

年龄	46 年
性别	女性
种族	高加索人
生长特性	附着物

引用	HROG33 T0 M1（Cytion 目录号 300878）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_4U48

培养基	DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
冷冻介质	作为冷冻保存培养基，我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1（Cytion 目录号 800100），其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，以促进恢复并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

HROG33 T0 M1 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制与分子分析