HROG12 T0 M1 细胞
一般信息
| 说明 | HROG12 T0 M1系由一名成人患者新鲜切除的肿瘤组织建立的人源性原发性多形性胶质母细胞瘤(GBM)细胞系,该患者经诊断为WHO IV级胶质母细胞瘤。 标记"T0"表示该标本取自初次手术干预,而"M1"则指代由此原发肿瘤衍生的体外模型。该细胞系在HROG(汉萨城市罗斯托克胶质瘤)模型平台内建立,该平台专注于建立保留患者特异性分子和生物学特征的超低代次胶质瘤培养体系。 HROG12 T0 M1在标准培养条件下表现为贴壁生长,呈现原发性胶质母细胞瘤培养物典型的成纤维细胞样形态。免疫表型分析显示该细胞系表达神经元及胶质细胞谱系标志物(如胶质纤维酸性蛋白GFAP、神经胶质细胞特异性蛋白nestin及波形蛋白vimentin),证实其星形细胞肿瘤起源。 在HROG细胞库中,分子特征分析涵盖MGMT启动子甲基化、EGFR扩增状态等临床相关生物标志物,以及TP53、IDH1/2、KRAS和BRAF等基因的突变分析,证实早期传代培养物中肿瘤相关基因组改变得以完整保留。 HROG12 T0 M1已被用于体外评估标准胶质母细胞瘤治疗(包括烷化剂)及在研靶向疗法的治疗反应。 跨HROG模型的比较分析表明,早期传代中具有稳定形态、可重复的生长动力学及一致的药物敏感性谱。作为患者来源的低传代级胶质母细胞瘤模型,HROG12 T0 M1为研究高级别胶质瘤的肿瘤生物学、分子异质性及治疗耐药机制提供了临床相关性研究平台。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 大脑 |
| 疾病 | 胶质母细胞瘤 |
特点
| 种族 | 高加索人 |
|---|---|
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HROG12 T0 M1(Cytion 目录号 300882) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_B7FR |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1(Cytion 目录号 800100),其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,以促进恢复并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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