HROG06 T0 M2 细胞
一般信息
| 说明 | HROG06 T0 M2 系由一名成人患者新鲜切除的肿瘤组织建立的人源性原发性多形性胶质母细胞瘤(GBM)细胞系,该患者经诊断为WHO IV级胶质母细胞瘤。 标记"T0"表示该肿瘤样本取自初次手术干预,而"M2"则指从同一原发肿瘤独立建立的第二个体外模型。该细胞系在HROG(汉萨城市罗斯托克胶质瘤)平台内开发,该平台专注于建立超低代次胶质瘤培养体系,以保留原发患者肿瘤的生物学及分子特征。 HROG06 T0 M2在标准化培养条件下呈粘附生长,展现原发性胶质母细胞瘤培养物典型的纺锤形成纤维细胞样形态。HROG系列免疫表型分析显示其表达神经和胶质细胞谱系标志物(如胶质纤维酸性蛋白GFAP、神经胶质细胞标记物nestin及波形蛋白),证实其星形胶质细胞肿瘤起源。 HROG平台的分子特征鉴定涵盖临床相关生物标志物评估,包括MGMT启动子甲基化状态、EGFR扩增,以及TP53、IDH1/2、KRAS和BRAF等基因的突变谱分析,证实早期传代培养中肿瘤相关基因组改变得以完整保留。 HROG06 T0 M2已被用于体外评估标准胶质母细胞瘤治疗(包括烷化剂类化疗药物及靶向抑制剂)的疗效反应。 HROG细胞库的比较分析表明,早期传代细胞具有稳定形态、可重复的生长动力学及一致的药物敏感性谱,证实其作为转化研究模型的适用性。作为患者来源的低传代胶质母细胞瘤细胞系,HROG06 T0 M2为研究胶质母细胞瘤生物学特性、肿瘤异质性及治疗耐药机制提供了临床相关性研究平台。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 大脑 |
| 疾病 | 胶质母细胞瘤 |
特点
| 种族 | 高加索人 |
|---|---|
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HROG06 T0 M2(Cytion 目录号 300883) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_B7FP |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1(Cytion 目录号 800100),其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,以促进恢复并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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