HROC222 T1 M2 细胞
一般信息
| 说明 | HROC222 T1 M2系人结直肠腺癌细胞系,由汉萨城市罗斯托克结直肠癌(HROC)模型库建立,源自成人患者切除的原发肿瘤。 标记"T1"表示标本取自首次手术时间点,"M2"则代表由此肿瘤建立的对应体外模型。HROC平台整合了综合生物样本库、标准化分子注释以及患者来源异种移植模型(PDX)与永久性低代次细胞系的并行建立,从而构建出具有临床注释的转化研究模型。 HROC222 T1 M2的建立遵循标准化流程:对新鲜切除的肿瘤组织进行机械分离,制备单细胞悬液,并接种于含谷氨酰胺、抗生素及抗真菌剂的定量肿瘤细胞培养基中,置于胶原蛋白包被的培养皿内培养。 在HROC队列中,约13%的尝试样本成功建立了永久性原代结直肠癌细胞系。统计分析显示,肿瘤分级较高与原代细胞系建立成功显著相关,而晚期淋巴结状态呈现正相关趋势。多变量分析表明,淋巴结转移是模型建立成功的独立预测因子。 HROC样本库涵盖结直肠癌所有主要分子亚型,包括染色体不稳定型(CIN)、CpG岛甲基化表型(CIMP)、微卫星稳定型(MSS)及微卫星不稳定高型(MSI-H)肿瘤,同时包含影响KRAS、 BRAF、TP53、APC及PIK3CA等关键驱动基因的多种突变背景。 HROC222 T1 M2在该严谨表征框架下建立,可整合详细的临床病理及分子数据,并能匹配对应的患者来源异种移植模型(PDX)材料。作为低传代患者来源的结直肠癌模型,HROC222 T1 M2适用于精准肿瘤学研究中肿瘤生物学机制、基因型-表型关联性及临床前治疗验证等领域。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 横结肠 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 转移部位 | 不适用(原发性横结肠肿瘤;T1 M2表示首次手术时间点,体外模型2) |
| 应用 | CRC研究;结直肠腺癌;HROC Linnebacher生物样本库;药物敏感性;肿瘤生物学;PDX与体外实验的整合 |
特点
| 年龄 | 79 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HROC222 T1 M2(Cytion 目录号 300859) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_VQ93 |
| 转基因生物现状 | 未经过基因改造;源自患者的野生型结直肠癌细胞系(HROC Linnebacher 生物样本库)。 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每 3 至 5 天 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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