HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry 细胞
一般信息
| 说明 | HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry 细胞系源自 HeLa Kyoto 细胞,是细胞生物学研究中使用的一种特殊模型。该细胞系经过基因工程改造,表达标记有单体增强绿色荧光蛋白(mEGFP)的极光 B 激酶(AURKB)和标记有 mCherry 的内中心粒蛋白(INCENP)。通过这些修饰,研究人员可以跟踪这些蛋白在细胞分裂过程中的动态和相互作用。极光 B 激酶对染色体分离和细胞分裂至关重要,而 INCENP 则是染色体乘客复合体(CPC)的重要组成部分,能协调有丝分裂的进程。 这种双重荧光标记为活细胞成像提供了强大的工具,可以详细研究蛋白质在细胞周期中的分布情况。HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry 细胞系对研究有丝分裂调控、染色体稳定性和有丝分裂检查点非常有价值。用于基因修饰的锌指核酸酶(ZFN)的精确性确保了该模型的准确性,使其成为癌症生物学和治疗开发领域高保真研究的理想选择。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 宫颈内口 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 转移部位 | 原发肿瘤部位(宫颈管) |
| 应用 | 染色体乘客复合体(CPC)生物学;Aurora B激酶与INCENP的动态变化;活细胞有丝分裂成像;双色荧光追踪;染色体分离;细胞质分裂;有丝分裂检查点;ZFN基因组编辑验证 |
| 同义词 | HK-ZFN-AURKB-mEGFP,ZFN-INCENP-mCherry |
特点
| 年龄 | 30年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 非洲裔美国人 |
| 形态学 | 具有镶嵌石形状的上皮样细胞 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (Cytion 目录号 300270) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_VL14 |
| 存款人 | 艾伦伯格实验室(EMBL) |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HeLa京都双荧光细胞系含有经ZFN技术构建的AURKB-mEGFP和INCENP-mCherry表达载体,用于染色体乘客复合体研究。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能存在差异。 |
生物分子数据
| 产品 | EGFP(增强型绿色荧光蛋白) |
|---|
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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