HEL-299 细胞
一般信息
| 说明 | HEL-299 是一种人肺成纤维细胞系,来源于一个成年人。这种细胞系在培养过程中的繁殖能力有限,通常在培养十次左右就会进入衰老期,这一点尤其引人注目。这一特性使 HEL-299 成为研究细胞衰老和衰老以及在受控条件下细胞生长和复制动态的有用模型。 除了在衰老研究中的应用,HEL-299 还是研究信号转导途径的模型。这种反应突出了该细胞系在药理学研究以及受体介导的信号转导和调节机制研究中的实用性。激酶活动后受体表达的改变可以让人们深入了解细胞对外部刺激的反应,从而有可能帮助开发针对各种疾病中类似通路的治疗策略。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 同义词 | HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 非洲 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HEL-299(Cytion 目录号 300193) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_2480 |
生物分子数据
| 表达的受体 | M2 肌肽受体 |
|---|---|
| 蛋白质表达 | P53 阴性 |
| 同工酶 | G6PD, A |
| 病毒易感性 | 水泡性口炎(印第安纳州),脊髓灰质炎病毒 1 |
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 核型 | 正常男性,二倍体,稳定 |
处理
| 培养基 | Ham's F12,w:1.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:1.0 mM 丙酮酸钠,w:1.1 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820600a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、1 ng/mL bFGF |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300193-130922 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300193 |
| 300193-180822 | 分析证书 | 22. Oct. 2025 | 300193 |