HEK293-VEGFR2 细胞
一般信息
| 说明 | 免责声明:所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构,价格约为 6,250 欧元。 HEK293-VEGFR2细胞是通过基因工程改造的人胚胎肾293(HEK293)细胞,可稳定表达人血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR/Flk-1)。该受体酪氨酸激酶是VEGF驱动的血管生成信号传导的主要介质。 VEGFR2主要表达于内皮细胞,通过激活包括MAPK/ERK、PI3K/AKT、PLCγ及SRC家族信号级联在内的下游通路,在血管发育、内皮细胞增殖、迁移、通透性及存活中发挥关键作用。VEGFR2信号传导失调会导致肿瘤血管生成、炎症性血管重塑及病理性新生血管形成,因此该受体已成为肿瘤学和血管疾病治疗领域的重要靶点。 HEK293-VEGFR2细胞广泛应用于血管生成研究和药物发现,用于表征VEGFR2靶向单克隆抗体、酪氨酸激酶抑制剂、配体捕获剂、双特异性抗体及抗血管生成生物制剂。 该稳定的重组表达系统支持对VEGF配体结合、受体磷酸化、下游信号激活、受体内化以及抑制剂效力的定量评估。这些细胞还常用于报告基因检测、基于流式细胞术的结合研究、激酶活性检测以及高通量治疗药物筛选工作流程。由于HEK293细胞支持强有力的重组蛋白表达和高效的扩增,它们为标准化VEGFR2检测方法的开发和机制信号研究提供了可靠的平台。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胎儿肾脏 |
| 疾病 | 转染/永生化;无致瘤性(HEK293背景) |
| 应用 | VEGFR2靶向抗体的研发(拉穆西鲁单抗类似物);血管生成研究;ADCC/CDC检测;流式细胞术;抗血管生成疗法筛选;肿瘤学和眼科研究 |
| 同义词 | HEK293/VEGFR2 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | HEK293-VEGFR2(Cytion 产品编号 305990) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_D7C3 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HEK293细胞系含有VEGFR2(KDR/FLK-1)表达载体,用于血管内皮生长因子受体研究及抗血管生成疗法的开发。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表达的受体 | VEGFR2 |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、1 mM 丙酮酸钠、10 mM HEPES 和 1% NEAA。加入基因素(G418-硫酸酯),使最终浓度达到 1 mg/mL。 |
| 解离试剂 | 胰蛋白酶-EDTA |
| 加倍时间 | 约24-36小时 |
| 亚培养 | 常规粘附细胞培养:吸出粘附细胞中的旧培养基,并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后,根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液(如 T25 烧瓶 1 毫升,T75 烧瓶 3 毫升),室温或 37°C 孵育直至细胞分离(5-10 分钟)。在显微镜下观察分离情况,必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后,加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA,轻轻重悬细胞,然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中,每 2-3 天更换一次培养基。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 2至4×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中,让细胞从冷冻过程中恢复并附着至少 24 小时。 为了在解冻细胞后获得最佳的附着力和存活率,我们建议在冷冻恢复后使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板进行首次播种。随后的细胞常规培养不需要胶原涂层。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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