HEK293-Rpn11-HTBH 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 305719

安全数据表

产品介绍

分析证书（CoA）

说明	稳定HEK293-Rpn11-HTBH细胞是HEK293 （人胚胎肾293）细胞系的稳定转染衍生物，经工程改造可表达带标签的Rpn11（又称PSMD14或POH1），该蛋白是26S蛋白酶体盖子复合体的去泛素化酶亚基。 Rpn11是一种Zn²⁺依赖性的JAMM结构域去泛素化酶，在蛋白酶体降解过程中，它能从与蛋白酶体结合的底物上去除泛素链。 HTBH标签（六组氨酸-TEV-生物素受体肽-六组氨酸）可在天然条件下实现含Rpn11复合物的亲和纯化，因此该细胞系特别适用于蛋白酶体复合物的纯化及相互作用组研究。该细胞系适用于 26S 蛋白酶体生物学、泛素-蛋白酶体通路（UPS）调控、Rpn11/PSMD14 在蛋白质质量控制中的功能、蛋白酶体组装与动力学以及蛋白酶体抑制剂作用机制的研究。它还用于天然蛋白酶体复合物的亲和纯化，并作为研究蛋白酶体背景下去泛素酶生物学的模型。HTBH 标签系统能够利用基于链霉亲和素的拉下法，对生物素标记的复合物进行高度严格的纯化。稳定的 HEK293-Rpn11-HTBH 细胞以贴壁培养方式，在添加了 10% FBS 和适当筛选抗生素的 DMEM 培养基中维持，并在 37°C、加湿的 5% CO₂ 环境中保持转基因表达。当细胞汇合度达到80–90%时，使用Accutase进行传代（传代比例为1:5至1:10）。每2–3天更换一次培养基。
有机体	人类
组织	肾脏
疾病	转基因/永生化胎儿肾脏（HEK293背景；Rpn11-HTBH转基因）
应用	26S蛋白酶体的生物学；Rpn11/PSMD14的功能；泛素-蛋白酶体通路；蛋白酶体复合物的纯化；去泛素酶的生物学；HTBH标签亲和纯化；蛋白酶体相互作用组研究

形态学	上皮样
细胞类型	上皮细胞
生长特性	附着物

引用	稳定HEK293细胞-Rpn11-HTBH（Cytion产品编号 305719）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
转基因生物现状	GMO-S1：该HEK293衍生物含有一个稳定整合的Rpn11-HTBH表达盒（六组氨酸-TEV-生物素受体肽-六组氨酸标签的Rpn11/PSMD14）。此分类仅适用于德国境内，在其他地区可能有所不同。

培养基	DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS
解离试剂	大多数细胞在PBS中即可脱落，如有必要，可在室温下加入Accutase处理5分钟
加倍时间	约24至36小时
亚培养	移除培养基，用不含钙和镁的PBS洗涤，加入Accutase覆盖细胞，在室温下孵育8–10分钟，用培养基重悬细胞，以300×g离心3分钟，弃去上清液，将细胞接种到新鲜培养基中。
分割比率	1 到 10
播种密度	2 至 4 × 10^⁴ ^个细胞/cm^²
流体更新	每 2 至 3 天
冷冻介质	作为冷冻保存培养基，我们使用完全生长培养基+10% DMSO，以获得足够的解冻后存活率。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 200 x g 离心 5 分钟，小心弃去含有冷冻培养基的上清液。按照解冻后恢复所述步骤进行操作
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

地段编号	证书类型	日期	目录编号
305719-040526	分析证书	24. Jun. 2026	305719

HEK293-Rpn11-HTBH 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制与分子分析

分析证书（CoA）