HEK293-PSMA 细胞
一般信息
| 说明 | 免责声明:所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构,价格约为 6,250 欧元。 HEK293-PSMA细胞是通过基因工程改造的人胚胎肾293(HEK293)细胞,可稳定表达人类前列腺特异性膜抗原(PSMA),亦称为谷氨酸羧肽酶II(FOLH1/GCPII)。 PSMA 是一种 II 型跨膜糖蛋白,具有叶酸水解酶和羧肽酶活性,在前列腺癌中高度表达,尤其在晚期、转移性及去势抵抗性疾病中。 除前列腺恶性肿瘤外,在多种实体瘤的新生血管中也观察到了PSMA的表达。由于其在肿瘤中的强表达及易于靶向的细胞外域,PSMA已成为诊断成像、放射性配体治疗、抗体药物及工程化免疫细胞疗法的主要靶点。 HEK293-PSMA细胞广泛应用于肿瘤学研究和治疗药物开发,用于表征PSMA靶向单克隆抗体、抗体药物偶联物、放射性药物、双特异性T细胞结合剂、CAR-T细胞疗法及小分子抑制剂。 该稳定的重组表达系统可实现配体结合、受体占用率、抗原密度、内化动力学以及靶向依赖性细胞毒性的定量分析。由于 PSMA 在与配体结合后会发生高效内化,因此这些细胞对于评估 PSMA 导向的成像探针和放射性配体平台尤为宝贵。 其他应用包括流式细胞术检测开发、摄取研究、报告基因检测、高通量筛选,以及前列腺癌治疗靶向递送系统的验证。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胎儿肾脏 |
| 疾病 | 转染/永生化;无致瘤性(HEK293背景) |
| 应用 | PSMA靶向抗体、ADC和放射性药物研发;前列腺癌治疗;CAR-T细胞疗法;ADCC/CDC检测;流式细胞术;前列腺癌研究 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | HEK293-PSMA(Cytion 货号 305992) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_6G28 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HEK293细胞系含有PSMA(FOLH1)表达载体,用于前列腺特异性膜抗原的研究及靶向治疗的开发。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表达的受体 | PSMA |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、1 mM 丙酮酸钠、10 mM HEPES 和 1% NEAA。加入基因素(G418-硫酸酯),使最终浓度达到 1 mg/mL。 |
| 解离试剂 | 胰蛋白酶-EDTA |
| 加倍时间 | 约24-36小时 |
| 亚培养 | 常规粘附细胞培养:吸出粘附细胞中的旧培养基,并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后,根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液(如 T25 烧瓶 1 毫升,T75 烧瓶 3 毫升),室温或 37°C 孵育直至细胞分离(5-10 分钟)。在显微镜下观察分离情况,必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后,加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA,轻轻重悬细胞,然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中,每 2-3 天更换一次培养基。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 2至4×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中,让细胞从冷冻过程中恢复并附着至少 24 小时。 为了在解冻细胞后获得最佳的附着力和存活率,我们建议在冷冻恢复后使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板进行首次播种。随后的细胞常规培养不需要胶原涂层。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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