HEK293-CLDN18.2 细胞
一般信息
| 说明 | 免责声明:所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构,价格约为 6,250 欧元。 HEK293-CLDN18.2细胞是通过基因工程改造的人胚胎肾293(HEK293)细胞,可稳定表达人类紧密连接蛋白18亚型2(CLDN18.2),这是一种属于紧密连接蛋白家族的紧密连接相关跨膜蛋白。 CLDN18.2是一种胃系特异性亚型,通常仅存在于分化的胃黏膜上皮细胞中,在生理条件下其细胞外域基本不可接触。 在恶性转化过程中,上皮极性和紧密连接结构的破坏使 CLDN18.2 暴露在肿瘤细胞表面,导致其在多种癌症中过表达并可被访问,包括胃腺癌、胃食管交界处癌、胰腺癌和其他胃肠道恶性肿瘤。 由于其在正常组织中的分布高度受限且在肿瘤中暴露,CLDN18.2 已成为肿瘤学中一个具有临床重要意义的治疗靶点。 HEK293-CLDN18.2细胞被广泛用于开发和表征CLDN18.2靶向治疗药物,包括单克隆抗体、抗体药物偶联物、双特异性抗体、CAR-T和CAR-NK细胞疗法以及靶向成像剂。 该稳定的重组表达系统可对抗原结合亲和力、表位特异性、受体密度、内化动力学以及靶标依赖性细胞毒性进行定量分析。 这些细胞还常用于流式细胞术检测、报告基因检测、抗体筛选工作流程,以及旨在评估抗体依赖性细胞毒性(ADCC)或补体依赖性细胞毒性(CDC)的免疫效应功能研究。由于 HEK293 细胞支持强效的重组膜蛋白表达和高效增殖,因此为标准化 CLDN18.2 检测方法的开发和治疗验证提供了可靠的平台。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胎儿肾脏 |
| 疾病 | 转染/永生化;无致瘤性(HEK293背景) |
| 应用 | CLDN18.2靶向抗体及ADC研发;CAR-T/CAR-NK细胞疗法;ADCC/CDC检测;流式细胞术;胃癌/胃食管结合部癌/胰腺癌治疗药物 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | HEK293-CLDN18.2(Cytion 产品编号 305986) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_E5J2 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HEK293细胞系含有CLDN18.2表达载体,用于紧密连接抗原研究及靶向癌症治疗的开发。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表面抗原 | CLDN18.2 |
|---|---|
| 表达的受体 | CDLN18.2 |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、1 mM 丙酮酸钠、10 mM HEPES 和 1% NEAA。加入基因素(G418-硫酸酯),使最终浓度达到 1 mg/mL。 |
| 解离试剂 | 胰蛋白酶-EDTA |
| 加倍时间 | 约24-36小时 |
| 亚培养 | 常规粘附细胞培养:吸出粘附细胞中的旧培养基,并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后,根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液(如 T25 烧瓶 1 毫升,T75 烧瓶 3 毫升),室温或 37°C 孵育直至细胞分离(5-10 分钟)。在显微镜下观察分离情况,必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后,加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA,轻轻重悬细胞,然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中,每 2-3 天更换一次培养基。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 2至4×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中,让细胞从冷冻过程中恢复并粘附(对于粘附培养物)至少 24 小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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