HCC366 细胞
一般信息
| 说明 | HCC366是一种人肺腺鳞癌细胞系,由德克萨斯大学西南医学中心哈蒙癌症中心从一名80岁欧洲女性患者的恶性胸腔积液中建立。 腺鳞癌是一种罕见的非小细胞肺癌(NSCLC)混合组织学亚型,兼具腺癌和鳞状细胞癌的特征。 HCC366 被纳入了癌症依赖性图谱(DepMap)、CCLE、COSMIC 细胞系以及 MD 安德森细胞系项目面板。 该细胞系携带纯合性 TP53 p.Tyr220Cys 突变(DNA 结合域的结构突变)和杂合性 ATM p.Pro534Ala 突变。 该细胞系不携带 KRAS、EGFR 或 STK11 驱动突变,且表现出微卫星稳定性(MSS)。倍增时间约为 60–70 小时。 HCC366适用于非小细胞肺癌(NSCLC)研究,特别适用于肺腺鳞癌生物学研究——相较于纯腺癌或鳞状细胞癌亚型,该领域目前研究仍显不足。主要应用包括:TP53功能获得性突变研究; ATM介导的DNA损伤应答;化疗敏感性与耐药性检测(顺铂、紫杉醇、吉西他滨);靶向药物的评估;在DepMap和CCLE框架内的药物敏感性分析;混合组织学非小细胞肺癌(NSCLC)的生物标志物发现;比较基因组学;以及蛋白质组学/转录组学分析。 HCC366 还为肺癌细胞生物学研究做出了贡献,包括与恶性胸膜病变相关的增殖、迁移和侵袭机制。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 疾病 | 非小细胞肺癌 |
| 转移部位 | 恶性胸腔积液(样本采集部位) |
| 应用 | 非小细胞肺癌(NSCLC)研究;肺腺鳞癌生物学;TP53 p.Tyr220Cys 获得功能研究;ATM DNA损伤应答;化疗敏感性(顺铂、紫杉醇、吉西他滨); DepMap/CCLE药物敏感性分析;生物标志物发现;非小细胞肺癌(NSCLC)比较基因组学;恶性胸膜疾病生物学 |
| 同义词 | HCC-366、HCC0366、哈蒙癌症中心 366 |
特点
| 年龄 | 80岁 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 欧洲 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | HCC366(Cytion 目录号 302155) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_2059 |
| 转基因生物现状 | 未经基因改造;携带内源性体细胞突变的野生型非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系(TP53 p.Tyr220Cys 纯合突变;ATM p.Pro534Ala 杂合突变) |
生物分子数据
| MSI 状态 | MSS |
|---|---|
| 突变概况 | TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) 纯合子;ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) 杂合子 |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 约60至70小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 1 至 3 × 10⁴ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以 5 × 10⁴ 个/cm² 的密度接种于培养皿中,并在首次更换培养基前让细胞附着至少 24 小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 302155-071024 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 302155 |