GT1-7细胞
一般信息
| 说明 | GT1-7系为永生化小鼠下丘脑神经元克隆亚系,可合成并分泌促性腺激素释放激素(GnRH),亦称黄体生成素释放激素(LHRH)。该细胞系通过转基因小鼠模型实现基因靶向致瘤,其SV40大T抗原在GnRH基因启动子调控下表达。 该策略导致下丘脑肿瘤形成,从中衍生出多个GnRH分泌细胞系,包括GT1-1、GT1-3和GT1-7。 GT1-7细胞呈现分化神经元表型,表达神经元特异性标记物(如神经丝蛋白、神经元特异性烯醇化酶、突触囊泡相关蛋白VAMP-2/SNAP-25及色粒蛋白B),且不表达胶质细胞标记物(如胶质纤维酸性蛋白或髓鞘蛋白),证实其神经元身份。 功能上,GT1-7细胞表达内源性GnRH mRNA,并以间歇性模式分泌GnRH。其具备完整的加工机制,可将前体GnRH转化为成熟的生物活性GnRH,包括必需的内肽酶、羧肽酶和酰胺化酶。这些细胞还分泌GnRH相关肽(GAP),这是前体GnRH加工的副产物。 生化分析揭示GT1-7细胞内及培养基中存在多种分子形式的前GnRH与成熟GnRH,表明存在活跃的翻译后加工过程。GT1-7细胞分泌的GnRH具有生物活性,可在体外刺激垂体前叶细胞释放LH。 与源自发育更不成熟、具有迁移能力的GnRH神经元的GN11等细胞系相比,GT1-7细胞在体外表现出较低的迁移活性。 GT1-7细胞被视为迁移后下丘脑GnRH神经元的代表,在培养中形成紧密连接的神经突连接性细胞群。其缺乏运动能力、具备成熟神经元特征并能响应调控因子,使其成为研究下丘脑GnRH神经元基因调控、发育控制及分泌生理学的强大模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 大脑,下丘脑 |
特点
| 细胞类型 | 促性腺激素释放激素神经元 |
|---|---|
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | GT1-7(赛通产品编号 305779) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0281 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该GT1-7神经元细胞系携带由促性腺激素释放激素(GnRH)启动子调控的SV40大T抗原转基因,用于GnRH分泌研究。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能存在差异。 |
生物分子数据
| 突变概况 |
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处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305779-211125 | 分析证书 | 15. Jan. 2026 | 305779 |