F9 细胞
一般信息
| 说明 | F9 细胞系是一种小鼠胚胎癌模型,来源于 C57BL/6 小鼠的睾丸畸胎瘤,是发育生物学和胚胎学的重要工具。F9 细胞在维甲酸和二丁烯环磷酸腺苷(cAMP)的作用下能够分化为顶叶内胚层。这种分化的特点是细胞行为和蛋白质表达发生显著变化,包括纤溶酶原激活剂、层粘连蛋白和 IV 型胶原蛋白的合成。这些蛋白质对于了解早期胚胎阶段的组织发育和基质形成过程至关重要。 据指出,cAMP 在诱导 F9 细胞分化方面的有效性取决于是否事先用视黄酸处理,这表明这些信号分子在触发发育途径方面存在复杂的相互作用。此外,F9 细胞的特点是具有三个 beta 1 整合素基因拷贝,这可能会影响细胞的粘附性和流动性,进一步突出了它们在研究细胞相互作用和细胞外基质组成方面的作用。这些细胞的安全性分析包括外胚叶病毒(鼠痘)检测,结果显示它们呈阴性,从而确保它们适合广泛的实验应用,而不会有病毒污染的风险。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 睾丸 |
| 疾病 | 畸胎瘤 |
特点
| 品种/亚种 | 129/Sv |
|---|---|
| 年龄 | 胚胎 |
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | F9(Cytion 目录编号 400174) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0259 |
生物分子数据
| 病毒 | MAP 测试阴性:仙台病毒、Ektromelie病毒、多瘤病毒、K病毒、Kilham病毒、Reo 3病毒、PVM病毒、LCM病毒、M.pulmonis病毒、MVM病毒、Theiler's GD VII病毒、Toolan's H-1病毒、MHV病毒、LDV病毒、RCV/SDA病毒、M-腺病毒、B.piliformis病毒。 |
|---|---|
| 产品 | 凝血酶原激活剂、层粘连蛋白、IV 型胶原蛋白 |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 用明胶包被细胞培养瓶。1×10⁴个细胞/平方厘米的密度约4天可形成融合细胞层。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 400174-412 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 400174 |