ETK-1 细胞
一般信息
| 说明 | ETK-1是一种人肝内胆管癌(IHCCA)细胞系,最初是从一名患有肉瘤样胆管癌的成年患者的腹水中建立的。 ETK-1 源自的肿瘤同时具有管状腺癌和肉瘤样成分,而该细胞系则反映了肉瘤样表型。 ETK-1 细胞以粘附方式生长,形成具有鹅卵石样外观的均匀上皮单层,主要由具有圆形至椭圆形细胞核和明显核仁的小多边形细胞组成。 早期传代细胞的细胞群倍增时间约为 70 小时,具有超二倍体核型,模态染色体数在 70 多条的中间值,这与侵袭性胆道恶性肿瘤典型的染色体不稳定性一致。 在免疫表型方面,ETK-1 细胞表达胆道上皮标志物,包括 γ-谷氨酰转肽酶 (GGT)、细胞角蛋白 18 (CK18) 和细胞角蛋白 19 (CK19),这证实了其胆管细胞起源。 在基础条件下,它们对α-胎蛋白(AFP)和白蛋白等肝细胞相关标志物呈阴性。 ETK-1 细胞表达维明蛋白,反映了其肉瘤样特征和部分间质表型,但缺乏癌胚抗原 (CEA) 和碳水化合物抗原 19-9 (CA19-9) 的表达。 这种标志物谱与原发肿瘤中观察到的肉瘤样成分相吻合,并突显了与上皮-间质转化样特性一致的特征。 ETK-1还被用作研究胆管癌中细胞可塑性和谱系分化的模型。 使用 DNA 甲基转移酶抑制剂 5-氮杂胞苷进行治疗后,诱导了形态和表型变化,从而产生了一种具有肝细胞样特征的衍生细胞系,包括表达 AFP、白蛋白、整合素 α1 和血小板生成素,同时某些胆道标志物丢失。 在异种移植模型中,未经处理的 ETK-1 细胞会形成与管状腺癌相符的肿瘤,表现出导管表型。 这些发现表明,ETK-1 保留了分化可塑性,是研究肝内胆管癌中胆管上皮向肝细胞的转分化、表观遗传调控以及肿瘤异质性的宝贵体外模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 转移性 |
| 疾病 | 胆管癌 |
| 转移部位 | 腹水 |
| 同义词 | ETK1 |
特点
| 年龄 | 61 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 日语 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | ETK-1(Cytion 产品编号 305529) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1206 |
生物分子数据
| 突变概况 | 突变:p.Arg175His,纯合子 |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
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| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase,5分钟,37°C |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 至 3 × 10⁴ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 转移部位: | 腹水 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305529-260526 | 分析证书 | 13. Jul. 2026 | 305529 |