DAKIKI 细胞
一般信息
| 说明 | DAKIKI 是一种人爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)阳性的 B 淋巴母细胞样细胞系,其表面表达 IgA1 并分泌聚合型 IgA1。该细胞系最初源自一名鼻咽癌成人患者的周围淋巴细胞,随后被建立为一种持续增殖的悬浮培养细胞系。 该细胞呈现典型的淋巴母细胞样形态,可在添加血清的RPMI培养基中生长。DAKIKI已被广泛用作人IgA1产生B细胞的模型,特别适用于研究免疫球蛋白合成、分泌调控及翻译后糖基化。 生化及凝集素分析表明,DAKIKI细胞分泌的IgA1在铰链区具有缺乏半乳糖的O-连接糖链。 单糖组成分析和凝集素ELISA证实,末端或α2,6-唾液酸化N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)残基富集,这是IgA肾病中观察到的异常糖基化IgA1的特征性糖型。 神经氨酸酶处理显著增加了 Helix aspersa 凝集素的反应性,表明存在唾液酸化 GalNAc 结构。使用 DAKIKI 细胞的高尔基体富集分馏物进行的功能检测证明了 CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1 α2,6-唾液酸转移酶活性,证实了这些细胞直接对缺乏半乳糖的 O-糖链进行唾液酸化的能力。 转录分析显示ST6-GalNAcII有表达,而ST6-GalNAcI无表达,这支持了ST6-GalNAcII在介导IgA1铰链区GalNAc的α2,6-唾液酸化中的作用。 除了在糖基化研究中的应用外,DAKIKI 还被评估了其对 B 细胞诱导因子和佛波酯的反应性,这些物质可调节某些人类 B 细胞系中的免疫球蛋白分泌。尽管 DAKIKI 会持续分泌 IgA,但它已被纳入用于研究免疫球蛋白产生调节和分化状态的 EBV 转化 B 细胞模型之中。 凭借其稳定的IgA1分泌特征以及可重复产生缺乏半乳糖、铰链区α2,6-唾液酸化糖链的能力,DAKIKI已成为一个表征充分的体外系统,用于探究IgA1糖基化机制、B细胞分化以及IgA相关疾病的分子发病机制。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 同义词 | DAKIKI,DAKIKI 克隆体 1 |
特点
| 年龄 | 未说明 |
|---|---|
| 性别 | 未说明 |
| 种族 | 非洲 |
| 形态学 | 淋巴母细胞 |
| 细胞类型 | B细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | DAKIKI(Cytion 产品编号 305928) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_3675 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | 无 |
| 亚培养 | 通过上下吸取操作轻柔匀化烧瓶中的细胞悬液,随后取代表性样本测定每毫升细胞密度。用新鲜培养基将悬液稀释至1×10⁵细胞/毫升浓度,并将调整后的悬液分装至新烧瓶中进行后续培养。 |
| 播种密度 | 2 至 5 × 10⁵ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305928-130426 | 分析证书 | 15. May. 2026 | 305928 |