CV-1 细胞
一般信息
| 说明 | CV-1 是 1964 年从非洲绿猴肾脏中提取的细胞系。这种类似成纤维细胞的细胞系最初用于研究致癌的 Rous 肉瘤病毒(RSV)的转化,现在被广泛用于病毒生产、转染和基因沉默等生物学研究。 这些细胞对逆转录酶呈阴性,对多种病毒易感,包括脊髓灰质炎病毒 1、单纯疱疹病毒、猿猴病毒 40(SV40)、加利福尼亚脑炎以及东西方马脑炎。 CV-1 细胞系生长迅速,可在塑料和玻璃表面附着生长,并在高通量水平上显示染色体数目变化。据观察,CV-1 细胞在经 ATG 处理的 Wistar 大鼠体内的致瘤性增强,在软琼脂中的细胞集落形成也增加。 此外,CV-1 细胞支持 SV40 病毒的复制,并在诱导猿、腺和乳头状病毒感染后表现出快速的胸苷激酶(TK)活性。CV-1 细胞的核型为 2n = 60,为假二倍体。 CV-1 细胞已被用于生物研究中的各种特定应用,包括药效测试、转染宿主和杀病毒剂测试。众所周知,CV-1 细胞也是转染(尤其是 SV40 载体转染)的合适宿主。 |
|---|---|
| 有机体 | 猴子 |
| 组织 | 肾脏 |
| 应用 | 适合转染的宿主,尤其是 SV40 载体。 |
| 同义词 | CV-1、CV 1、CV-1.K、CV1 |
特点
| 年龄 | 141 天 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 细胞类型 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | CV-1(Cytion 目录编号 605471) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9534 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0229 |
生物分子数据
| 病毒易感性 | 脊髓灰质炎病毒 1、单纯疱疹、东方马脑炎、西方马脑炎、加利福尼亚脑炎、SV40 |
|---|---|
| 逆转录酶 | 阴性 |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 建议比例为 1:2 至 1:3 |
| 播种密度 | 每平方厘米3至4×10⁴个细胞将在约4天内形成融合细胞层。 |
| 流体更新 | 每周 2 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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