CT26.CL25 细胞
一般信息
| 说明 | CT26.CL25细胞系是一种小鼠结肠癌模型,来源于亲代CT26细胞系,后者是一种化学诱导的未分化结肠癌,来源于BALB/c小鼠。CT26.CL25经过基因改造,能表达β-半乳糖苷酶(β-gal)蛋白,是研究肿瘤免疫学和免疫疗法,特别是肿瘤相关抗原(TAAs)的绝佳模型。通过这种改造,可以针对作为新抗原的β-gal进行特异性免疫学研究,从而促进肿瘤免疫逃避机制的研究以及癌症疫苗或采用性细胞疗法的开发。 CT26.CL25 已被用于临床前模型,以研究免疫反应和免疫疗法的疗效,如使用负载有肿瘤相关抗原的树突状细胞 (DC)。研究表明,使用从逆转录病毒抗原(如 gp70)中提取的多肽脉冲 DC 的免疫策略可以引起强有力的抗肿瘤免疫反应。在实验模型中,可以观察到针对 gp70 的 CD8+ 细胞毒性 T 淋巴细胞(CTL)的活化,这表明该细胞系可用于测试免疫治疗方法。然而,用这种肽载荷的 DC 进行免疫有其局限性,尤其是在治疗已确诊的转移瘤方面,这凸显了将预防性免疫反应转化为治疗效果所面临的挑战。 此外,CT26.CL25 经常被用于测试联合免疫疗法的疗效,如使用免疫检查点抑制剂或癌症疫苗。例如,有研究评估了节律化疗联合免疫检查点抑制剂的影响,其中 CT26.CL25 诱导免疫原性细胞死亡(ICD)对增强抗肿瘤免疫反应至关重要。这些研究表明,以免疫检查点为靶点可与化疗协同提高肿瘤排斥率并建立长期免疫记忆。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 结肠 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 同义词 | CT26 克隆 25 |
特点
| 品种/亚种 | BALB/c |
|---|---|
| 年龄 | 未说明 |
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | CT26.CL25(Cytion 目录号 305353) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_7255 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:这种小鼠结肠癌细胞系(CT26.CL25)含有编码 lacZ 和 Tn5-neo 的逆转录病毒载体,可实现 β-半乳糖苷酶表达和新霉素抗性。该构建体可稳定整合到 CT26 细胞中。此分类仅适用于德国国内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 抗原表达 | H-2d |
|---|---|
| 致肿瘤性 | 是,在 BALB/c 小鼠中 |
| 产品 | 表达的基因:β-半乳糖苷酶(β-gal)、H-2D |
| 突变概况 | 基因缺失:基因缺失:Cdkn2a,同型;突变:Kras,p.Gly12Asp(c.35G>A),同型:Kras,p.Gly12Asp (c.35G>A),同型 |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、1% NEAA、0.4 mg/mL G418、2.5 g/L 葡萄糖和 10 mM HEPES。 |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305353-200325 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305353 |