CHO-PD-L1 细胞
一般信息
| 说明 | 免责声明:所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构,价格约为 6,250 欧元。 CHO-PD-L1细胞是经过基因工程改造的重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,可稳定表达人类程序性死亡配体1(PD-L1;CD274/B7-H1)。PD-L1作为一种免疫检查点配体,在抑制T细胞介导的免疫应答中起着核心作用。 PD-L1是一种I型跨膜蛋白,主要与活化免疫细胞表面的程序性细胞死亡蛋白1(PD-1/CD279)相互作用,从而抑制T细胞增殖、细胞因子产生及细胞毒性活性。 PD-L1的异常表达是多种实体瘤和血液恶性肿瘤逃避免疫监视的常见机制,因此表达PD-L1的重组细胞模型对免疫肿瘤学研究和治疗开发具有重要意义。 CHO-PD-L1细胞被广泛用于免疫检查点抑制剂的开发和表征,包括针对PD-1/PD-L1信号轴的单克隆抗体、双特异性抗体、融合蛋白及工程化细胞疗法。PD-L1的稳定可控表达使得能够定量评估抗体的结合亲和力、受体占用率、阻断活性、内化过程以及配体-受体相互作用动力学。 这些细胞还适用于流式细胞术检测开发、报告基因生物测定、T细胞活化研究,以及旨在评估检查点阻断疗效或免疫突触形成的高通量筛选平台。由于CHO细胞提供了一个稳健且背景相对较低的表达系统,因此常被选用于标准化检测方法的建立和生物制品质量控制应用。 |
|---|---|
| 有机体 | 中国仓鼠 |
| 组织 | 卵巢 |
| 疾病 | 中国仓鼠卵巢细胞,非肿瘤性;经基因工程改造,可表达PD-L1(CD274/B7-H1)表面抗原 |
| 应用 | 抗体筛选;PD-L1靶向免疫疗法研发;免疫检查点抑制剂研究;肿瘤免疫逃逸研究;流式细胞术 |
特点
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 粘附/悬浮 |
监管数据
| 引用 | CHO-PD-L1(Cytion 产品编号 305975) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A8X1 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该CHO细胞系含有CD274表达盒,可用于受体功能分析。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表面抗原 | PD-L1(CD274/B7-H1) |
|---|---|
| 表达的受体 | PD-1/CD279 |
处理
| 培养基 | 用于粘附培养:DMEM:Ham's F12 (1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 商品编号 820400a)。 用于悬浮培养:CHO 生长培养基 A(来自 InSCREENeX;InSCREENeX 目录编号 INS-ME-1039) |
|---|---|
| 补充剂 | 用于粘附培养:在培养基中添加 5% FBS。加入基因素(G418-硫酸酯),使最终浓度达到 0.5 mg/mL。 |
| 解离试剂 | 用于粘附培养:胰蛋白酶-EDTA |
| 加倍时间 | 约14-16小时 |
| 亚培养 | 用于常规粘附细胞培养:吸出粘附细胞中的旧培养基,并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后,根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液(如 T25 烧瓶 1 毫升,T75 烧瓶 3 毫升),室温或 37°C 孵育 5-10 分钟,直至细胞分离。在显微镜下观察细胞分离情况,必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后,加入完全培养基使胰蛋白酶/EDTA 失活,轻轻重悬细胞,然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中,每 2-3 天更换一次培养基。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 2至5×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中,让细胞从冷冻过程中恢复并粘附(对于粘附培养物)至少 24 小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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