CHO-K1 细胞(悬浮培养适应型)
一般信息
| 说明 | CHO-K1 细胞是从 CHO 细胞系中衍生出来的一个亚系,而 CHO 细胞系最初是在 20 世纪 50 年代初从中国仓鼠卵巢中培育出来的。CHO-K1 细胞被广泛用于生产治疗性单克隆抗体和其他生物制药。CHO-K1 细胞之所以被广泛用于生物制药蛋白质的生产和疫苗接种,是因为它们具有真核细胞的特性,可以进行适当的折叠、组装和翻译后修饰(如糖基化),从而影响所生产蛋白质的稳定性、有效性和安全性。 在重组蛋白质生产领域,CHO-K1 细胞系可用于表达各种蛋白质,包括单克隆抗体、生长因子、细胞因子和酶。这些蛋白质可用于治疗、诊断检测和疫苗制剂。 CHO-K1 细胞生长速度快,能适应各种培养条件,包括悬浮培养和粘附培养,因此在大规模生物生产过程中具有很高的价值。CHO-K1 细胞具有高度的遗传稳定性,可有效扩增和表达外源基因,这对于生产高产量的重组蛋白质至关重要,因此可用于稳定细胞系的开发。 CHO-K1 中国仓鼠细胞可以很容易地转染各种载体进行基因表达,促进基因编辑或基因敲除。这种灵活性使研究人员能够在 CHO-K1 宿主细胞中引入特定基因、沉默基因,甚至使用 CRISPR-Cas9 等技术进行靶向基因编辑。 总之,中国仓鼠 CHO-K1 细胞和 CHO 细胞在生物技术研究和生物制药生产中举足轻重,为研究基因功能和大规模生产重组蛋白提供了一个多功能平台。 |
|---|---|
| 有机体 | 中国仓鼠 |
| 组织 | 卵巢 |
| 应用 | 这种细胞系是毒理学、工业生物技术和生物生产的最佳选择。 |
| 同义词 | CHO K1、CHOK1、CHO 细胞克隆 K1、GM15452 |
特点
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | CHO-K1悬浮培养细胞(Cytion产品编号 603486) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0214 |
生物分子数据
| 病毒易感性 | 水泡性口炎(印第安纳)、Getah 病毒 抗病毒物:脊髓灰质炎病毒 2、莫多克病毒、扣柳病毒 |
|---|---|
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 核型 | 染色体频率分布 50 个细胞:2n = 22。干系数为低二倍体 |
处理
| 培养基 | 赛默飞世尔(ThermoFisher)CD CHO细胞,无血清,即用型。 |
|---|---|
| 补充剂 | L-谷氨酰胺:使用前将其浓度调整至最终8 mM(通常每升200 mM储备液中加入40 mL)。对于CD CHO细胞,此步骤必不可少。向细胞悬液中加入1:100浓度的抗结块剂和1:100浓度的HT补充剂。 |
| 解离试剂 | 无 |
| 加倍时间 | 22 小时 |
| 亚培养 | 通过上下吸取操作轻柔匀化烧瓶中的细胞悬液,随后取代表性样本测定每毫升细胞密度。用新鲜培养基将悬液稀释至1×10⁵细胞/毫升浓度,并将调整后的悬液分装至新烧瓶中进行后续培养。 |
| 播种密度 | 4 × 10⁵ 个细胞/毫升 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C,5% CO₂,加湿培养环境。细胞必须在带挡板的埃伦迈耶摇瓶中,以110 rpm的速度在轨道式摇床中培养。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 603486-160126 | 分析证书 | 26. Mar. 2026 | 603480 |