CHO-EGFR细胞
一般信息
| 说明 | 免责声明:所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构,价格约为 6,250 欧元。 CHO-EGFR细胞是经过基因工程改造的重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,可稳定表达人类表皮生长因子受体(EGFR/ERBB1/HER1),这是一种属于ErbB家族的受体酪氨酸激酶。 EGFR通过激活下游信号通路(如MAPK/ERK、PI3K/AKT和JAK/STAT)来调控细胞增殖、存活、迁移和分化等关键过程。EGFR的异常表达、扩增或突变常与多种实体瘤相关,包括非小细胞肺癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤以及头颈部鳞状细胞癌。 稳定的CHO-EGFR模型为研究受体生物学和治疗靶点提供了受控平台。 CHO-EGFR细胞广泛应用于肿瘤学研究和生物制剂开发,用于表征抗EGFR单克隆抗体、酪氨酸激酶抑制剂、双特异性抗体、抗体药物偶联物以及工程化免疫细胞疗法。这些细胞支持对配体结合、受体激活、内化、磷酸化状态、下游信号传导及治疗性阻断的定量评估。 它们还常用于流式细胞术检测、受体占位研究、高通量筛选以及效价检测工作流程。由于 CHO 细胞具有稳健的生长特性且人类受体系统的内源性表达相对较低,因此为重组 EGFR 的表达和标准化检测方法的开发提供了可重复的背景。 |
|---|---|
| 有机体 | 中国仓鼠 |
| 组织 | 卵巢 |
| 疾病 | 中国仓鼠卵巢细胞,非肿瘤性;经基因工程改造,可在细胞表面表达EGFR |
| 应用 | 抗体筛选;EGFR靶向治疗研发;ADCC/CDC检测;肺癌/结直肠癌研究;流式细胞术 |
特点
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 卵巢上皮细胞 |
| 生长特性 | 粘附/悬浮 |
监管数据
| 引用 | CHO-EGFR(Cytion 产品编号 305977) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A8W3 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该CHO细胞系含有EGFR表达盒,可用于受体功能分析。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表面抗原 | EGFR(HER1/ErbB1/CD340) |
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处理
| 培养基 | 用于粘附培养:DMEM:Ham's F12 (1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 商品编号 820400a)。 用于悬浮培养:CHO 生长培养基 A(来自 InSCREENeX;InSCREENeX 目录编号 INS-ME-1039) |
|---|---|
| 补充剂 | 用于粘附培养:在培养基中添加 5% FBS。加入基因素(G418-硫酸酯),使最终浓度达到 0.5 mg/mL。 |
| 解离试剂 | 用于粘附培养:胰蛋白酶-EDTA |
| 加倍时间 | 约14-16小时 |
| 亚培养 | 用于常规粘附细胞培养:吸出粘附细胞中的旧培养基,并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后,根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液(如 T25 烧瓶 1 毫升,T75 烧瓶 3 毫升),室温或 37°C 孵育 5-10 分钟,直至细胞分离。在显微镜下观察细胞分离情况,必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后,加入完全培养基使胰蛋白酶/EDTA 失活,轻轻重悬细胞,然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中,每 2-3 天更换一次培养基。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 2至5×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中,让细胞从冷冻过程中恢复并粘附(对于粘附培养物)至少 24 小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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