CERV-186 细胞
一般信息
| 说明 | CERV-186 细胞系由宫颈癌 MRI-H-186 的异种移植体外培养而成,是侵袭性、大细胞、非角化鳞状细胞癌的生物学模型。该细胞系是在梅森研究所博德根博士的指导下建立和改造的,用于体内移植。MRI-H186 具有基因组特性,含有约 26 个 HPV16 基因组全长和截短形式的整合拷贝,对其转录组特征有显著影响。 MRI-H186细胞的显著特征是全长和截短的早期HPV16转录本的强表达,尤其是E5全长(fl)RNA的高水平表达。这种转录特征与在 CaSki 和 MRI-H196 等其他宫颈癌细胞系中观察到的特征明显不同。此外,MRI-H186 的转录活性(各种其他转录本的表达)与 HPK-IA 和 C3 细胞系中观察到的模式非常接近,表明这些模型中存在类似的转录行为。MRI-H186细胞中存在全长和截短的HPV16基因组整合是其早期病毒转录本表达活跃的关键因素,E5 fl RNA的大量表达尤其突出了这一点。这种强烈的转录活动在早期多聚腺苷酸化信号处达到顶峰,突显了 MRI-H186 细胞系内独特的转录动态。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 子宫颈 |
| 疾病 | 鳞状细胞癌 |
| 同义词 | Cerv-186、MRI-H-186、MRI-H186 |
特点
| 年龄 | 42 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 非洲 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | CERV-186(Cytion 目录号 300290) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5720 |
生物分子数据
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠身上 |
|---|---|
| 病毒 | HPV-16 阳性 |
| 产品 | 细胞角蛋白 8、18、波形蛋白、去瘤蛋白 |
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 2×10⁴个细胞/平方厘米将在7天内形成融合的单层细胞。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '30:01:01
B*: '13:02:01
C*: '06:02:01
DRB1*: '07:01:01
DQA1*: '02:01:01
DQB1*: '02:02:01
DPB1*: '03:01:01
E: '01:01:01
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300290-515SF | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300290 |