BT-474 细胞
一般信息
| 说明 | BT-474 是一种人类乳腺癌细胞系,来源于一名 60 岁女性的乳腺导管癌。该细胞系雌激素和孕激素受体阳性,是研究激素反应性乳腺癌的重要模型。BT-474 细胞的另一个特点是 HER2/neu(人表皮生长因子受体 2)的过度表达,这种蛋白质被扩增,在某些侵袭性乳腺癌的发病和发展过程中起着至关重要的作用。 BT-474 细胞系被广泛用于肿瘤研究,以研究乳腺癌增殖的分子机制,并测试针对激素受体和 HER2 通路的治疗策略。这些细胞尤其适用于研究 HER2 靶向疗法(如曲妥珠单抗(赫赛汀))的疗效,以及探索这些疗法的抗药性机制。该细胞系还有助于进一步了解激素操作如何影响癌细胞的生长和存活,为激素依赖性肿瘤的潜在治疗方法提供启示。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 乳房、乳腺 |
| 疾病 | 浸润性导管癌 |
| 转移部位 | 导管 |
| 同义词 | Bt-474, BT474 |
特点
| 年龄 | 60 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 细胞以紧凑、缓慢生长的多层集落形式生长,很少汇合。不会形成汇合单层。 |
监管数据
| 引用 | BT-474(Cytion 目录号 300131) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0179 |
生物分子数据
| 表达的受体 | her-2/neu+, er+, pr+ |
|---|---|
| 同工酶 | G6PD,B,PGM3,1,PGM1,1,ES-D,1,Me-2,0,AK-1,1,GLO-1,1,表型频率产品: 0.0426 |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠身上 |
| 病毒易感性 | 小鼠乳腺肿瘤病毒(RIII-MuMTV) |
| MSI 状态 | 稳定 (MSS) |
| 突变概况 | TP53 突变 |
| 核型 | 模式 = 55,范围 = 50 至 112,双峰移位 58 - 59,在有 3 条标记染色体的后期传递中为 100 |
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、10 微克/毫升胰岛素 |
| 加倍时间 | 60 至 80 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 2×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成基本融合的细胞层。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 几乎 100% 的回收细胞存活率大于 90 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '01:01:01, '29:02:01
B*: '07:02:01, '44:03:01
C*: '07:02:01, '16:01:01
DRB1*: '04:01, '15:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '06:02:01
DPB1*: '04:01:01G、'05:01:01G
E: '01:01:01, '01:03:02
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300131-210325 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300131 |
| 300131-261023 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300131 |