B16-F10-Luc 细胞
一般信息
| 说明 | B16-F10-Luc是B16-F10小鼠黑色素瘤细胞系的生物发光衍生物,该细胞系最初是从C57BL/6小鼠体内自发发生的黑色素瘤中建立的。由于其具有较高的转移潜能,且在同基因C57BL/6宿主中能实现强效且可重复的植入,亲本B16-F10细胞系在癌症研究中被广泛应用。 在 B16-F10-Luc 细胞中,通过慢病毒转导,将荧光素酶基因稳定整合在恒定活性启动子(通常为 EF-1α 或 CMV)的调控下,从而在多次传代过程中实现高水平、稳定的荧光素酶表达。 在存在荧光素底物的情况下,B16-F10-Luc 细胞会发出生物发光信号,从而能够对活体动物的肿瘤生长、扩散和转移进行非侵入性的定量体内生物发光成像 (BLI)。 该细胞系适用于 C57BL/6 小鼠的皮下和静脉注射(实验性转移)模型,转移性克隆优先在肺部形成。发光强度与存活细胞数呈线性正比,从而可在无需在每个时间点处死动物的情况下,对肿瘤负荷进行实时、纵向监测。荧光素酶的表达不会显著改变 B16-F10 细胞的体外或体内生长动力学。 主要应用包括在同系小鼠模型中评估抗肿瘤药物、免疫疗法及抗转移化合物,以及在肿瘤学临床前研究中进行定量药效学成像。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 皮肤 |
| 疾病 | 小鼠黑色素瘤 |
特点
| 品种/亚种 | C57BL/6 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 纺锤形细胞和上皮样细胞的混合物 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | B16-F10-Luc(Cytion 产品编号 305658) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_C8XU |
| 转基因生物现状 | GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere. |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | 吕克 |
|---|---|
| 抗原表达 | Luc2 (firefly, codon-optimized) |
| 产品 | 黑色素 |
| MSI 状态 |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305658-310326 | 分析证书 | 15. May. 2026 | 305658 |
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