B-LCL-HROG02 细胞
一般信息
| 说明 | B-LCL-HROG02 是一株由人类爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）转化而来的 B 淋巴母细胞样细胞系 （B-LCL），源自 HROG 生物样本库系列中一名 68 岁白人男性胃癌患者的外周血，该系列是 HROC 结直肠癌 B-LCL 样本库的胃癌对应样本库。 通过EBV介导的原代外周血B淋巴细胞体外永生化，获得了一种形态类似淋巴母细胞、能稳定增殖的悬浮细胞系。HROG02细胞持续表达EBV潜伏期抗原（EBNA-1、-2、-3、 LMP-1、-2），并高水平表达HLA I类和II类分子、共刺激分子CD80和CD86、黏附分子CD54和CD58，以及B细胞标志物CD19、CD20和CD23。 B-LCL-HROG02 适用于 T 细胞和 NK 细胞功能检测、HLA 分型、混合淋巴细胞反应、抗原呈递研究以及 CTL 诱导方案。 在 HROG 患者匹配生物样本库中，该细胞系为胃癌研究提供了明确的免疫学参考标准，可用于开展肿瘤相关免疫应答的自体或异体研究。该细胞系支持对胃癌特异性 T 细胞反应性以及与胃肿瘤免疫学相关的患者匹配免疫检测系统的研究。 B-LCL-HROG02 在含 15–20% FBS 的 RPMI 1640 培养基中进行悬浮培养，培养条件为 37°C、加湿的 5% CO₂ 环境。 每 2–3 天通过稀释至 2–5 × 10⁵ 细胞/毫升进行传代。无需酶解分离。使用该 EBV 阳性细胞系进行的所有工作，均须符合 BSL-2 生物安全防护要求，以及关于 EBV 转化生物材料的适用机构和国家法规。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | EBV转化B淋巴母细胞样细胞系（B-LCL）；胃癌相关供体 |
| 应用 | 免疫学研究；T细胞和NK细胞检测；HLA分型；抗原呈递研究；混合淋巴细胞反应；CTL检测靶细胞；胃癌免疫学 |
特点
| 年龄 | 68岁 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 淋巴母细胞样 |
| 细胞类型 | B 淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | B-LCL-HROG02（Cytion 产品编号 302106） |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| 转基因生物现状 | GMO-S2：该B-LCL含有一个稳定维持的EBV外源环状DNA，其编码病毒潜伏期基因（EBNA-1/-2/-3、LMP-1/-2）。 EBV被归类为第2类风险病原体。操作时需在BSL-2级生物安全实验室中进行。此分类仅适用于德国境内；其他司法管辖区的规定可能有所不同。 |
生物分子数据
| 病毒 | 变形体：EBV |
|---|
处理
| 培养基 | RPMI 1640，w：2.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：2.0 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820700a）。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中加入15–20%的FBS |
| 加倍时间 | 24 至 48 小时 |
| 亚培养 | 每2–3天用新鲜预热的完全培养基将培养物稀释至2–5 × 10⁵个细胞/毫升。传代前计数活细胞，以维持最佳密度。 培养物浓度不得超过2 × 10⁶个细胞/毫升。必要时可通过离心（300 × g，5分钟）进行培养基更换。无需进行酶解分离。 |
| 分割比率 | 1 至 4 |
| 播种密度 | 2 至 5 × 10⁵ 个细胞/毫升 |
| 流体更新 | 每 2 至 3 天 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基，我们使用完全生长培养基+10% DMSO，以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |