B-LCL-HROC69 细胞
一般信息
| 说明 | B-LCL-HROC69系由原发性结直肠癌标本HROC69中分离的肿瘤浸润性B细胞(TiBc)建立的、经爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)永生化的B淋巴母细胞样细胞系。该亲本肿瘤源自一名成年男性患者,其患有常规散发型右侧结直肠癌且处于晚期。 B细胞从新鲜切除的肿瘤组织中分离,并在环孢素A抑制T细胞和NK细胞增殖的条件下,利用EBV阳性狨猴细胞系B95/8的上清液进行体外永生化处理。 EBV转化的B细胞克隆通常在数周内增殖,其克隆性通过采用BIOMED-2多重PCR方案进行免疫球蛋白重链和轻链基因重排分析得到证实。 通过对长期培养上清液进行同种型特异性ELISA检测,发现B-LCL-HROC69细胞分泌免疫球蛋白A(IgA)。与平行建立的若干IgG产生型TiBc细胞系不同,在初始功能筛选实验中,HROC69来源的IgA未进一步进行肿瘤细胞结合特性鉴定。 关键的是,在无外源性EBV存在的情况下,B细胞培养物未发生自发性增殖,表明该永生化过程属于体外事件,而非体内EBV潜伏感染的结果。 因此,B-LCL-HROC69作为单克隆、抗原经历的肿瘤浸润性B细胞模型,适用于研究结直肠癌微环境中的体液免疫应答,并可用于识别被局部扩增B细胞克隆识别的肿瘤相关抗原。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | 癌症 |
| 同义词 | B-LCL CO69、Bc HROC69、TiBcHROC69 |
特点
| 年龄 | 62 岁 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 圆形电池 |
| 细胞类型 | B 淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | B-LCL-HROC69(Cytion 目录号 300864) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_YD53 |
生物分子数据
| 表面抗原 | CD19 |
|---|---|
| 病毒 | 变形体:EBV |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS |
| 亚培养 | 通过上下吸取操作轻柔匀化烧瓶中的细胞悬液,随后取代表性样本测定每毫升细胞密度。用新鲜培养基将悬液稀释至1×10⁵细胞/毫升浓度,并将调整后的悬液分装至新烧瓶中进行后续培养。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300864-150125 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300864 |
| 300864-190225 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300864 |