B-LCL-HROC68 细胞
一般信息
| 说明 | B-LCL-HROC68系由原发性结直肠癌(编号HROC68)中分离的肿瘤浸润性B细胞(TiBc)建立的、经爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)永生化的人源B淋巴母细胞样细胞系。该细胞系的亲本肿瘤为一例晚期成人男性患者切除的散发性结直肠癌。 新鲜肿瘤组织经机械分离后,在含EBV的B95/8松鼠猴细胞系上清液中培养B细胞,同时添加环孢素A抑制T细胞和NK细胞增殖。 长期培养后,B细胞呈现单克隆扩增,通过BIOMED-2多重PCR方案进行的免疫球蛋白基因重排分析证实,其表现出与克隆起源相符的单一优势重排模式。 B-LCL-HROC68 细胞系分泌的免疫球蛋白 G (IgG) 是其唯一的同种型,在长期培养过程中保持稳定生产。 在针对异源性结直肠癌细胞系(HROC24、HROC46和HCT116)的细胞基ELISA筛选中,B-LCL-HROC68衍生的IgG显示出可测量的肿瘤细胞结合能力,其中对HCT116细胞的结合信号最强。然而后续流式细胞术验证表明,其结合亲和力相较于其他肿瘤浸润B细胞衍生的IgG较弱。 这些发现表明,B-LCL-HROC68代表一种单克隆、具有抗原经验的肿瘤浸润性B细胞系,能够产生具有可检测肿瘤细胞反应性的功能性IgG,为研究结直肠癌微环境中的体液免疫反应以及潜在肿瘤相关抗原的鉴定提供了有用的体外工具。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | 癌症 |
| 同义词 | Bc HROC68、TiBcHROC68 |
特点
| 年龄 | 84 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 圆形电池 |
| 细胞类型 | B 淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | B-LCL-HROC68(Cytion 目录号 302078) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A7UU |
生物分子数据
| 表面抗原 | CD19 |
|---|---|
| 病毒 | 变形体:EBV |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS |
| 亚培养 | 通过上下吸取操作轻柔匀化烧瓶中的细胞悬液,随后取代表性样本测定每毫升细胞密度。用新鲜培养基将悬液稀释至1×10⁵细胞/毫升浓度,并将调整后的悬液分装至新烧瓶中进行后续培养。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '02:01:01, '29:02:01
B*: '13:02:01, '44:03:01
C*: '06:02:01, '16:01:01
DRB1*: '07:01:01
DQA1*: '02:01:01
DQB1*: '02:02:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:01, '01:03
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