B-LCL-HROC60 细胞
一般信息
| 说明 | B-LCL-HROC60是一种由原发性结直肠癌(编号HROC60)中分离的肿瘤浸润性B细胞(TiBc)建立的、经爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)永生化的人B淋巴母细胞样细胞系。 该亲本肿瘤源自一名成年男性患者,其右侧结直肠癌属于CpG岛甲基化表型高表达(CIMP-H)分子亚型。 新鲜肿瘤组织经机械分离获得单细胞悬液,在环孢素A抑制T细胞和NK细胞增殖的条件下,使用源自B95/8狨猴细胞系的含EBV上清液进行体外选择性永生化处理。 长期扩增后形成单克隆B细胞培养物,经标准化克隆性检测的免疫球蛋白重链和轻链基因重排分析证实。 B-LCL-HROC60主要分泌免疫球蛋白M(IgM)作为主导亚型,并在长期培养中保持稳定产率。在结直肠癌衍生的更广泛肿瘤浸润性B细胞系系列中,每个克隆的免疫球蛋白分泌均限于单一主要亚型,且在无外源性EBV存在时未发生自发性增殖,排除了体内潜伏EBV驱动的转化。 作为源自CIMP-H型结直肠癌的单克隆、抗原经验丰富的TiBc衍生物系,B-LCL-HROC60为研究结直肠肿瘤微环境中的体液免疫反应、表征肿瘤浸润B细胞衍生物质功能特性提供了重要的体外模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | 癌症 |
| 同义词 | Bc HROC60、TiBcHROC60 |
特点
| 年龄 | 71 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 圆形电池 |
| 细胞类型 | B 淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | B-LCL-HROC60(Cytion 目录号 302004) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A7UT |
生物分子数据
| 表面抗原 | CD19 |
|---|---|
| 病毒 | 变形体:EBV |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS |
| 亚培养 | 通过上下吸取操作轻柔匀化烧瓶中的细胞悬液,随后取代表性样本测定每毫升细胞密度。用新鲜培养基将悬液稀释至1×10⁵细胞/毫升浓度,并将调整后的悬液分装至新烧瓶中进行后续培养。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '02:01:01, '11:01:01
B*: '44:02:01, '55:01:01
C*: '03:03:01, '05:01:01
DRB1*: '01:01:01, '13:01:01
DQA1*: '01:01:01, '01:03:01
DQB1*: '05:01:01, '06:03:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01
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