B-LCL-HROC59 细胞
一般信息
| 说明 | B-LCL-HROC59是一种由原发性结直肠癌(编号HROC59)中分离的肿瘤浸润性B细胞(TiBc)建立的、经爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)永生化的人B淋巴母细胞样细胞系。该原发肿瘤摘自一名患有右侧散发性结直肠癌且处于晚期阶段的成年男性患者。 新鲜肿瘤组织经机械分散制备单细胞悬液,在环孢素A抑制T细胞与NK细胞扩增的条件下,利用B95/8松鼠猴细胞系来源的EBV含病毒上清液实现B细胞体外选择性永生化。长期培养后,经免疫球蛋白基因重排分析证实,该细胞系可稳定增殖单克隆B细胞群体。 B-LCL-HROC59细胞仅分泌免疫球蛋白G(IgG)亚型,且在长期培养中保持稳定产率。在细胞结合实验中,该细胞来源的IgG对受试异源性结直肠癌细胞系的结合能力显著弱于其他TiBc来源的IgG(后者表现出更强的肿瘤细胞反应性)。 在建立培养体系时,未检测到外源性EBV存在下B细胞自发增殖的证据,表明其永生化过程发生于体外,而非反映体内EBV潜伏驱动的转化。 作为单克隆、抗原经验丰富的肿瘤浸润性B细胞系,B-LCL-HROC59为研究结直肠癌微环境中的体液免疫反应,以及探索肿瘤相关抗体的特异性和功能特性提供了明确的模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | 癌症 |
| 同义词 | Bc HROC59、TiBcHROC59 |
特点
| 年龄 | 76 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 圆形电池 |
| 细胞类型 | B 淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | B-LCL-HROC59(Cytion 目录号 302073) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A7US |
生物分子数据
| 表面抗原 | CD19 |
|---|---|
| 病毒 | 变形体:EBV |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS |
| 亚培养 | 通过上下吸取操作轻柔匀化烧瓶中的细胞悬液,随后取代表性样本测定每毫升细胞密度。用新鲜培养基将悬液稀释至1×10⁵细胞/毫升浓度,并将调整后的悬液分装至新烧瓶中进行后续培养。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '03:01:01, '24:02:01
B*: '01:02:01, '27:05:02
C*: '02:02:02, '07:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:02:01, '06:02:01
DPB1*: '04:01:01, '14:01:01
E: '01:03:02
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