B-LCL-CDG5 细胞
一般信息
| 说明 | B-LCL-CDG5是一种EBV转化的B淋巴细胞系,来源于一名PMM2-CDG患者,PMM2*基因突变导致先天性糖基化紊乱(CDG)。这种疾病会损害糖蛋白和糖脂上糖结构的正常合成和附着,影响多个器官系统。磷酸甘露糖突变酶2(PMM2)的缺乏会破坏甘露糖-6-磷酸向甘露糖-1-磷酸的转化,而甘露糖-1-磷酸是糖基化过程中的一个关键步骤,从而导致细胞功能缺陷和全身并发症。 B-LCL-CDG5作为一种EBV-immortalized B细胞系,是研究*PMM2*突变的生化和分子效应的重要模型。这种细胞系使研究人员能够研究糖基化缺陷、PMM2 酶活性以及糖基化受损的细胞后果。此外,它还为测试潜在的治疗方法(如药理伴侣、酶增强疗法或底物补充策略)提供了一个平台。B-LCL-CDG5与其他CDG患者衍生细胞系相结合,有助于增进我们对PMM2-CDG的了解,并开发有针对性的治疗方案。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | EBV转化B淋巴母细胞样细胞系(B-LCL);PMM2-CDG(先天性糖基化障碍,源自患者) |
| 转移部位 | 不适用(EBV转化性B细胞淋巴细胞样细胞瘤;无转移) |
| 应用 | 免疫细胞中 CDG 作用的基因分型、功能测试(如 B 细胞表面抗原)、细胞毒性药物测试。突变分析、细胞凋亡机制分析、HLA 分型、不同细胞糖蛋白的糖基化缺陷对不同功能的影响。 |
特点
| 性别 | 女性 |
|---|---|
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 圆形电池 |
| 细胞类型 | B 淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬挂系统、集群 |
监管数据
| 引用 | B-LCL-CDG5(Cytion 目录号 302016) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | 未分配 |
| 转基因生物现状 | GMO-S2:该B-LCL含有一个稳定维持的EBV外源环状DNA,其编码病毒潜伏期基因(EBNA-1/-2/-3、LMP-1/-2)。 EBV属于第2类风险病原体;需在BSL-2级防护条件下进行操作。此分类仅适用于德国境内;其他地区的相关规定可能有所不同。 |
生物分子数据
| 病毒 | 变形体:EBV |
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处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS |
| 亚培养 | 通过定期添加或更换培养基来维持细胞培养。初始培养时细胞密度应为2×10⁵个细胞/毫升,并保持细胞浓度在1×10⁵至5×10⁵个细胞/毫升范围内以获得最佳生长效果。 |
| 流体更新 | 一旦中等颜色变成黄色 |
| 解冻后恢复 | 中型 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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