B-LCL-CDG4 细胞
产品编号
302015
一般信息
| 说明 | B-LCL-CDG4是一种EBV转化的B淋巴细胞系,来源于一名患有CDAII的年轻女孩。CDAII 是一种罕见的遗传性贫血,属于 CDG 糖基化紊乱。CDAII 患者的 COPII 成分 SEC23B 基因有缺陷,该基因参与细胞内蛋白质转运系统(特别是从 ER 的囊泡出芽)。患者为该基因的同基因突变。红细胞膜的带3糖蛋白糖基化不足,糖蛋白的多半乳糖胺基团糖基化异常,而糖磷脂糖基化异常,因此CDA II红细胞的带3具有截短的杂交型寡糖。这表明高尔基糖基化酶甘露糖苷酶 II 或乙酰葡糖胺基转移酶 II 存在额外缺陷。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 疾病 | 先天性糖基化紊乱 |
| 应用 | 免疫细胞 CDG 影响的基因分型、功能测试(如 B 细胞表面抗原)、细胞毒性药物测试、突变分析、细胞凋亡机制分析、HLA-分型、不同细胞糖蛋白糖基化缺陷对不同功能的影响。 |
特点
| 年龄 | 儿童 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 圆形电池 |
| 细胞类型 | B 淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬挂系统、集群 |
监管数据
| 引用 | B-LCL-CDG4(Cytion 目录号 302015) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A9Y2 |
生物分子数据
| 表面抗原 | CD15(Lewis x)+、CD15s(苷元化 Lewis x)-、CD75s(苷元化乳氨酰基低聚糖)+、CD173(血型 H)-、CD174(血型 Lewis y)-、CD175(Tn)-、CD175s(苷元化 Tn)-、CD176(TF)+ |
|---|---|
| 抗原表达 | CD19+、CD20+、CD37+、CD43+、CD44+、CD45+、CD45R0-、MHC Cl.I+、MHC Class II (HLA-DR)+ |
| 病毒 | 变形体:EBV |
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% 热灭活 FBS |
| 亚培养 | 通过定期添加或更换培养基来维持细胞培养。初始培养时细胞密度应为2×10⁵个细胞/毫升,并保持细胞浓度在3×10⁵至5×10⁵个细胞/毫升范围内以获得最佳生长效果。 |
| 流体更新 | 一旦中等颜色变成黄色 |
| 解冻后恢复 | 中型 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '01:01:01, '24:02:01
B*: '08:01:01, '18:01:01
C*: '07:01:01, '12:03:01
DRB1*: '03:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '05:01:01
DQB1*: '02:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:02:01
E: '01:01, '01:03
|