A704 细胞
一般信息
| 说明 | A-704 是一种人上皮细胞系,来源于一名 78 岁男性腺癌患者的肾组织。该细胞系呈现上皮形态。它是癌症研究,尤其是腺癌研究的宝贵资源。A-704 是一种多用途细胞系,可用于三维细胞培养和作为转染宿主。 A-704 由 D.J. Giard 培育,在实验中保持了一致性和可靠性。核型分析表明,A-704 细胞表现出断裂、双中心和内重复等异常现象,从二倍体到超二倍体,从超三倍体到超四倍体不等。 虽然 A-704 细胞在免疫抑制小鼠体内不致瘤,但可在半固体培养基中形成菌落。A-704 细胞表现出特定的同工酶特征,包括 AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1 和 PGM3。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肾脏 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 同义词 | A.704, A-704 |
特点
| 年龄 | 78 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | A704(Cytion 目录号 300217) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1065 |
生物分子数据
| 同工酶 | Me-2,1,PGM3,1-2,PGM1,1,ES-D,1,AK-1,1,GLO-1,2,G6PD,B |
|---|---|
| 致肿瘤性 | 没有 |
| 核型 | (P59)二倍体至超二倍体、超三倍体至超四倍体,有断裂、双中心和内重复等异常现象 |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1×10⁴个细胞/cm²将在4天内形成融合的单层细胞。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '34:02:01, '74:01:01
B*: '35:01:01, '44:03:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '15:03:01G
DQA1*: '01:02:01
DQB1*: '06:02:01
DPB1*: '02:01:19, '04:02:01G
E: '01:01:01, '01:03
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300217-614SF | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300217 |
| 300217-310125 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300217 |