A673 细胞
一般信息
| 说明 | A673 细胞系是生物科学的宝贵资源。该细胞系来源于一名被诊断为 Ewings 肉瘤的 15 岁女性患者的肌肉组织,具有明显的多边形形态。 最初,人们认为该细胞系来源于横纹肌肉瘤(RMS)。 A673 细胞的一个显著特点是能够产生多种具有致癌潜能的生长因子。这些细胞还能分泌生长抑制因子,为细胞生长调节提供一个平衡的环境。这些特性使 A673 细胞成为研究肿瘤促进因子和肿瘤抑制因子之间相互作用的极佳模型。A673 细胞具有致瘤潜力,因为它们能诱导免疫抑制小鼠形成肿瘤。 此外,研究还发现 A673 细胞系中与癌症有关的基因启动子甲基化过度。这些基因改变进一步提高了其在癌症研究中的相关性,为探索表观遗传修饰及其对肿瘤发生和发展的影响提供了一个平台。 虽然 A673 细胞通常被称为尤文肿瘤(ET)或肉瘤(ES),但它们也与横纹肌肉瘤(RMS)有关。值得注意的是,A673 细胞系具有复杂的核型,涉及 11 号和 22 号染色体的特定易位。这种易位导致 EWS 和 FLI1 基因的融合,这是尤文肿瘤的特征性基因事件。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 骨质 |
| 疾病 | 尤文氏肉瘤 |
| 同义词 | A-673、RMS 1598、RMS1598 |
特点
| 年龄 | 15 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 纤维母细胞样 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | A673(Cytion 目录号 300454) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0080 |
生物分子数据
| 致肿瘤性 | 是,在免疫抑制小鼠中 |
|---|---|
| 病毒易感性 | 对人类腺病毒高度敏感 |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 28 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1×10⁴个细胞/平方厘米将在8天内形成融合单层。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300454-3d21 | 分析证书 | 26. May. 2025 | 300454 |