A549-RFP细胞
一般信息
| 说明 | A549-RFP 是人 A549 肺腺癌细胞系的荧光标记衍生物,经过基因工程改造,可持续表达红色荧光蛋白(RFP),以便进行实时可视化和追踪。 亲本 A549 细胞系源自一名成年供体的肺腺癌,具有上皮形态和贴壁生长特征。A549 细胞保留了 II 型肺泡上皮细胞的特征,包括细胞角蛋白的表达以及产生表面活性剂相关蛋白的能力。 稳定RFP表达盒的引入使细胞能够持续发出荧光,同时不会显著改变亲本细胞系的固有增殖和代谢特性,因此A549-RFP适用于纵向成像研究。 在大型癌细胞面板中对 A549 细胞进行的功能表征表明,细胞大小、蛋白质含量和蛋白质合成速率与细胞体积呈正相关,且较大的细胞往往增殖较慢。 在比较分析中,A549细胞属于相对较小、增殖较快的上皮癌细胞系,这与那些维明蛋白表达较高、E-钙粘蛋白水平较低、体积较大且更具间质样特征的细胞形成鲜明对比。 这些代谢和表型差异对于实验解释具有重要意义,因为蛋白质合成率和代谢通量与细胞大小成正比,并影响细胞对靶向增殖或 mTOR 调节的合成代谢通路的药物的敏感性。RFP 修饰既保留了 A549 细胞用于此类代谢和药理学研究的适用性,又实现了直接可视化。 A549-RFP 广泛应用于共培养系统、原位和异位异种移植模型以及侵袭或转移实验中,在这些实验中,荧光标记有助于将肿瘤细胞与基质或宿主成分区分开来。 稳定的红色荧光支持多种应用,包括活细胞成像、高通量筛选、基于流式细胞术的定量分析以及体内光学成像。 作为一种特征明确的肺腺癌模型的可追溯变体,A549-RFP 为在体外和体内环境下研究肿瘤细胞增殖、上皮-间质转化、药物反应以及肿瘤-微环境相互作用提供了一个强大的平台。 基因修饰:通过复制缺陷型慢病毒转导进行稳定修饰,以表达红色荧光蛋白(RFP)报告基因;在嘌呤霉素筛选(1–5 µg/mL)条件下维持为多克隆细胞群。S1/BSL-1 生物安全等级。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 疾病 | 肺腺癌 |
| 同义词 | A549, A549, NCI-A549, A549/ATCC, A549 ATCC, A549ATCC, 人源性A549 |
特点
| 年龄 | 58 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | A549-RFP(赛通产品编号 305659) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0023 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该细胞系通过复制缺陷型慢病毒转导,稳定整合了红色荧光蛋白(RFP)报告基因。 由此获得的多克隆细胞群在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选条件下维持。需采用S1级生物安全防护。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | 征求建议书 |
|---|---|
| 抗原表达 | RFP(红色荧光蛋白) |
| MSI 状态 | 突变:p.Gly12Ser,纯合子;突变:p.Gln37Ter,纯合子 |
| 突变概况 | 突变:p.Gly12Ser,纯合子;突变:p.Gln37Ter,纯合子 |
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),含:3.1 g/L 葡萄糖,2.5 mM L-谷氨酰胺,15 mM HEPES,0.5 mM 丙酮酸钠,1.2 g/L NaHCO3(Cytion 产品编号 820400a) |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 20-40小时 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305659-240226 | 分析证书 | 27. Mar. 2026 | 305659 |