射频/6A 电池
一般信息
| 说明 | RF/6A 是一种从恒河猴(Macaca mulatta)胎儿脉络膜和视网膜组织建立的视网膜脉络膜内皮细胞系。该细胞系在 Cellosaurus 数据库中的注册编号为 CVCL_4552,呈贴壁单层生长,具有上皮样形态。 RF/6A细胞保留了关键的内皮细胞特征,包括第八因子(冯·维勒布兰德因子)和纤维连接蛋白的表达,以及可通过电子显微镜检测到的韦贝尔-帕拉德颗粒——后者证实了其内皮细胞的身份。 该细胞系最初是为了研究视网膜和脉络膜血管化而建立的,现已被广泛用作眼部血管生成研究中的灵长类内皮细胞模型。 RF/6A 适用于眼部血管生成研究、视网膜和脉络膜血管化研究、抗血管生成药物(VEGF 抑制剂、贝伐珠单抗、雷珠单抗)的评估、 年龄相关性黄斑变性(AMD)模型构建、糖尿病视网膜病变生物学研究,以及眼部微环境中血管通透性的评估。 由于源自非人灵长类(NHP),RF/6A 比啮齿类内皮细胞模型更接近人类视网膜血管生物学,特别是在涉及灵长类特异性 VEGF 同工型反应和眼部药理学的研究中。该细胞系常用于管状结构形成实验、迁移实验以及 VEGF 刺激实验。 RF/6A 细胞以贴壁培养方式维持,培养基为添加了 10% FBS 和 1% NEAA 的 EMEM,培养条件为 37°C、加湿的 5% CO₂ 环境。 当细胞汇合度达到 70–80% 时,使用 Accutase 进行传代,以防止接触抑制和内皮表型丢失。传代比例为 1:3 至 1:5,接种密度为 1–2 × 10⁴ 个细胞/cm²。每周更换培养基 2–3 次。 |
|---|---|
| 有机体 | 恒河猴 |
| 组织 | 脉络膜、视网膜 |
| 疾病 | 正常视网膜脉络膜内皮(胎儿;非致瘤性) |
| 转移部位 | 不适用(正常胎儿视网膜脉络膜内皮细胞系) |
| 应用 | 眼部血管生成研究;视网膜和脉络膜血管化;抗VEGF疗法评估(贝伐珠单抗、雷珠单抗);年龄相关性黄斑变性(AMD)和糖尿病视网膜病变模型构建;管状结构形成实验;血管通透性;非人灵长类动物视网膜内皮细胞模型 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 性别不详 |
| 种族 | 不适用(非人类灵长类细胞系;黑猩猩) |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 内皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | RF/6A(Cytion 目录号 305150) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9544 |
| CellosaurusAccession | CVCL_4552 |
| 转基因生物现状 | 未经基因改造;野生型恒河猴胎儿视网膜脉络膜内皮细胞系 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | 因子Ⅷ、纤连蛋白 |
|---|
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 约24至36小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 1 至 2 × 10⁴ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,以 5 × 10⁴ 个细胞/cm² 的密度将细胞接种于培养皿中,并在首次更换培养基前至少等待 24 小时,以便细胞附着。切勿让培养物达到完全汇合状态,因为接触抑制可能会削弱内皮细胞表型。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305150-160223 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305150 |
| 305150-160223SF | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305150 |
| 305150-180625 | 分析证书 | 18. Aug. 2025 | 305150 |
| 305150-260723 | 分析证书 | 22. Jan. 2026 | 305150 |