U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 細胞

USUSD$800.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 300174

安全資料表

產品說明書

分析證明書 (CoA)

說明	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 是一種源自人類骨肉瘤 U-2 OS 親本細胞系的基因改造細胞系。此細胞系透過 CRISPR-Cas9 基因編輯技術，將單體增強型綠色螢光蛋白（mEGFP）標記靶向插入至 NUP96 基因位點。 NUP96 作為核孔複合體的一部分，對核內運輸至關重要；其與 mEGFP 的融合，使得在螢光顯微鏡下能夠即時觀察核孔的動態變化，從而為核內運輸機制及核-細胞質間的物質運輸提供寶貴的見解。此特定克隆（編號 195）因其能穩定表達 NUP96-mEGFP 融合蛋白而被篩選出來，並保留了 U-2 OS 細胞系的典型特徵，包括強健的細胞骨架結構，這對於與癌細胞遷移及轉移相關的研究至關重要。 CRISPR 技術的應用確保了精確的基因編輯，將可能影響實驗結果完整性的脫靶效應降至最低。這使得 U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 第 195 號克隆特別適用於高解析度成像技術及詳細的細胞結構研究，有助於推動細胞生物學、癌症研究及核轉運現象等領域的先進研究。
生物體	人類
組織	骨頭
疾病	骨肉瘤

年齡	15年
性別	女性
族裔	高加索人
形態學	上皮樣
生長特性	依附者

引用	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 第 195 號克隆（Cytion 型號 300174）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9606
Cellosaurus 編號	CVCL_B7FJ
存款人	艾倫伯格實驗室（EMBL）
轉基因狀態	GMO-S1：此人類骨肉瘤細胞系（U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP，克隆 195）含有透過慢病毒遞送導入的、經 CRISPR 工程改造之 NUP96-mEGFP 融合蛋白，可藉此對核孔複合體進行螢光追蹤。該修飾已穩定整合。此分類僅適用於德國境內，其他地區的歸類方式可能有所不同。

蛋白質表達	MEGFP（核孔複合體蛋白 96，標記有 mEGFP）

培養基	麥考伊 5a 培養基，含：3.0 g/L 葡萄糖，含：穩定型谷氨酰胺，含：2.0 mM 丙酮酸鈉，含：2.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820200a）
營養補充品	在培養基中加入 10% FBS 及 1% NEAA
解離試劑	Accutase
傳代培養	從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
播種密度	2 至 3 × 10⁴ 個^細胞/cm^²
流體更新	每週 2 至 3 次
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

批次編號	證書類型	日期	型號
300174-322	分析證明書	23. May. 2025	300174
300174-151124	分析證明書	23. May. 2025	300174
300174-130226	分析證明書	13. Mar. 2026	300174

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U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 細胞

一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析

分析證明書 (CoA)