U2OS-CRISPR-NUP96-Halo 細胞

USUSD$800.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 300448

安全資料表

產品說明書

分析證明書 (CoA)

說明	U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo 是一種源自人類骨肉瘤 U-2 OS 細胞的基因工程細胞系。該細胞系已透過 CRISPR-Cas9 技術進行修飾，將 HaloTag 整合至 NUP96 基因位點。 NUP96 作為核孔複合體的組成部分，在核轉運及細胞調控中扮演著關鍵角色。導入 HaloTag 後，便能精確地觀察並進行生化分析，以闡明 NUP96 在細胞內的動態變化及其相互作用。透過促進螢光配體或其他探針的共價結合，HaloTag 能夠實現即時成像，並為研究活細胞中的核轉運機制提供了一種強大的工具。此特定克隆（編號 252）因其能穩定表達帶有 HaloTag 的 NUP96 而被選中，可確保在實驗設置中表現一致。此特性使其極適合應用於高解析度成像技術及分子相互作用研究，從而支援細胞生物學的先進研究，特別是在核功能與基因調控的領域中。
生物體	人類
組織	骨頭
疾病	骨肉瘤

年齡	15年
性別	女性
族裔	高加索人
形態學	上皮樣
生長特性	依附者

引用	U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo（Cytion 型號 300448）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9606
Cellosaurus 編號	CVCL_B7FI
存款人	艾倫伯格實驗室（EMBL）
轉基因狀態	GMO-S1：此人類骨肉瘤細胞系（U2OS-CRISPR-NUP96-Halo，克隆號 252）含有透過慢病毒遞送所產生的 CRISPR 編輯 NUP96-Halo 融合蛋白，可對核孔複合體進行螢光標記。該修飾已穩定整合。此分類僅適用於德國境內，其他地區的歸類可能有所不同。

蛋白質表達	NUP96-Halo（內源性核孔複合體蛋白 96，帶有 Halo 標記）

培養基	麥考伊 5a 培養基，含：3.0 g/L 葡萄糖，含：穩定型谷氨酰胺，含：2.0 mM 丙酮酸鈉，含：2.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820200a）
營養補充品	在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
解離試劑	Accutase
傳代培養	從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
播種密度	1 × 10^⁴ ^個細胞/cm^²
流體更新	每週 2 至 3 次
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

批次編號	證書類型	日期	型號
300448-221	分析證明書	23. May. 2025	300448
300448-221	分析證明書	23. May. 2025	300448
300448-221	分析證明書	26. May. 2025	300448
300448-311024	分析證明書	26. May. 2025	300448

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一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析

分析證明書 (CoA)