Bunky SW-620 – vplyv na výskum a experimentovanie v oblasti rakoviny hrubého čreva
Bunky SW-620 tvoria ľudskú bunkovú líniu kolorektálneho karcinómu v štádiu C podľa Dukesa. Vyznačujú sa vysokým tumorigenickým a metastatickým potenciálom. Preto sa široko využívajú v onkologických a toxikologických štúdiách. Tento článok sa bude zaoberať základnými aspektmi bunkovej línie rakoviny hrubého čreva SW-620.
- Rastové médium
- Pre ideálny rast buniek SW-620 sa používa médium DMEM doplnené o 10 % fetálneho bovinného séra, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutamínu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného. Rôstové médium by sa malo vymieňať dvakrát týždenne.
- Doba zdvojnásobenia
- Doba zdvojnásobenia buniek SW-620 sa pohybuje v rozmedzí 20 až 26 hodín.
- Typ rastu
- Bunka línie SW-620 je adhezívna. Bunky tvoria monovrstvy na povrchu kultivačnej nádoby.
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- BSL-1
- K dispozícii od
- Cytion — Objednajte si SW-620
Pôvod a všeobecné charakteristiky buniek SW-620
Pôvod a všeobecné charakteristiky sú základnými informáciami o bunkovej línii. Predchádzajúca znalosť týchto informácií je nevyhnutná pre výskumníkov, ktorí zvažujú jej použitie vo svojom výskume. V tejto časti článku vysvetlíme kľúčové vlastnosti a pôvod bunkovej línie SW-620. Dozviete sa hlavne: Čo je bunková línia SW620? Aké sú charakteristiky bunkovej línie SW-620? Aký je pôvod buniek SW-620? Aká je veľkosť buniek SW-640? A aký je rozdiel medzi bunkami SW-620 a SW-480?
- SW-620, bunková línia kolorektálneho karcinómu, pochádza z mediálnej lézie lymfatického uzliny 51-ročného muža kaukazského pôvodu s adenokarcinómom hrubého čreva [1]. Túto bunkovú líniu uložili A. Leibovitz a spolupracovníci.
- Bunky SW-620 majú epiteliálnu morfológiu. Skladajú sa z malých okrúhlych a bipolárnych buniek, ktoré zodpovedajú mikrovilám.
- Veľkosť buniek SW-620 je 14,4 ± 0,3 μm v priemere.
- Tieto bunky rakoviny hrubého čreva majú hyperdiploidný karyotyp. Modálny počet chromozómov pre bunky SW-620 je 50, pričom sa môže pohybovať v rozmedzí od 45 do 53.
SW-480 vs. SW-620
SW-480 a SW-620 sú bunkové línie kolorektálneho karcinómu. SW-480 bola odvodzovaná z primárneho nádoru, zatiaľ čo SW-620 bola získaná z metastázovanej lymfatickej uzliny. Navyše sa xenotransplantáty vyvinuté z týchto bunkových línií od seba líšia. Xenotransplantáty SW-620 vytvárajú vrstvy nádorových buniek, zatiaľ čo xenotransplantáty SW-480 tvoria žľazovité štruktúry [2]. Obe bunkové línie majú identické mutačné profily.
Bunky SW-620: Informácie o kultivácii
Je nevyhnutné pochopiť základné princípy kultivácie buniek danej buneckej línie, pretože to vedie k správnej manipulácii a udržiavaniu buniek. V tejto časti sú uvedené niektoré kľúčové body týkajúce sa kultivácie buniek SW-620, ktoré vám pomôžu zistiť: Čo je kultivačné médium pre bunky SW-620? Aká je doba zdvojnásobenia buniek SW-620? Ako sa kultivujú bunky SW-620?
Kľúčové body kultivácie buniek SW-620
Doba zdvojnásobenia:
Doba zdvojnásobenia buniek SW-620 sa pohybuje v rozmedzí 20 až 26 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:
Bunky línie SW-620 sú adhezívne. Tvorí monovrstvu na povrchu kultivačnej nádoby.
Pomer subkultivácie:
Bunky SW-620 sa subkultivujú v pomere rozdelenia 1: 3. Adherentné bunky sa prepláchnu fosfátovým fyziologickým roztokom (1X) bez horčíka a vápnika. Následne sa pridá pasážovací roztok Accutase a bunky sa inkubujú pri izbovej teplote po dobu 8 až 10 minút. Pridá sa čerstvé médium a bunky sa odstreďujú. Následne sa zozbierané bunky opatrne resuspendujú v rastovom médiu a rozdelia do nových fliaš na rast.
Rastové médium:
Pre ideálny rast buniek SW-620 sa používa médium DMEM doplnené o 10 % fetálneho bovinného séra, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutamínu, 1,5 g/l NaHCO₃ a 1,0 mM pyruvátu sodného. Rôstové médium by sa malo vymieňať dvakrát týždenne.
Podmienky kultivácie:
Bunky karcinómu hrubého čreva SW-620 sa kultivujú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a s 5 % CO₂.
Skladovanie:
Po zmrazení sa bunky SW-620 skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C v mrazničkách s ultra nízkou teplotou alebo v parnej fáze tekutého dusíka.
Proces zmrazenia a médium:
CM-1 alebo CM-ACF je ideálne mraziace médium pre bunky SW-620. Na zmrazenie buniek SW-620 sa používa proces pomalého zmrazovania. Umožňuje pokles teploty iba o 1 °C za minútu, čím sa chráni životaschopnosť buniek.
Proces rozmrazovania:
Zmrazené bunky SW-620 sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli nastavenom na 37 °C po dobu 40 až 60 sekúnd. Po rozmrazení sa pridá kultivačné médium a bunky sa odstreďujú, aby sa odstránili zložky mraziaceho média. Následne sa získaný bunkový pelet resuspenduje v rastovom médiu a bunky sa prelejú do novej fľaše na kultiváciu.
Úroveň biologickej bezpečnosti:
Na manipuláciu s kultúrami SW-620 je potrebné laboratórium úrovne biologickej bezpečnosti 1 (BSL-1).
Výhody článkov SW-620
Výhody
- Modelovanie karcinómu hrubého čreva: Bunky SW-620 slúžia ako kľúčový model karcinómu hrubého čreva, čo umožňuje podrobné štúdium mechanizmov nádorov a metastáz, najmä v modeloch s xenotransplantátmi.
- Výskum rakoviny a liečba: Tieto bunky uľahčujú skúmanie biológie rakoviny, účinnosti chemoterapie a mechanizmov bunkovej smrti, vrátane anoikízy.
- Expresia CD133: Expresia CD133 v bunkách SW-620 poskytuje pohľad na biológiu rakovinových kmeňových buniek a jej vplyv na tumorigenézu a rezistenciu voči liečbe.
- Aplikácie prietokovej cytometrie: Analýza týchto buniek pomocou prietokovej cytometrie umožňuje posúdenie bunkových populácií, úrovne apoptózy a proliferácie.
Výskumné aplikácie buneckej línie SW-620
Nižšie sú uvedené oblasti výskumu, v ktorých sa bunky SW-620 javí ako sľubný nástroj:
- Výskum rakoviny: SW-620 je neoceniteľný bunkový model na štúdium biológie kolorektálneho karcinómu. Výskumníci využívajú tento in vitro model na skúmanie molekulárnych mechanizmov riadiacich rast, inváziu a migráciu rakovinových buniek. Okrem toho sa dá použiť na štúdium mutácií v bunkovej línii SW620, t. j. p53, APC a KRAS. Výskum vykonaný v roku 2021 skúmal vplyv mutácie KRAS v bunkovej línii SW620 na citlivosť nového lieku FL118. Zistili, že nadmerná expresia KRAS zvyšuje apoptózu kolorektálnych buniek indukovanú liekom FL118, zatiaľ čo jej potlačenie ju znižuje. Tieto výsledky môžu pomôcť pri predpovedaní použitia lieku FL118 u pacientov s karcinómom hrubého čreva s mutáciou KRAS [3].
- Skríning a vývoj liekov: Bunková línia SW-620 sa široko využíva na skríning a testovanie potenciálnych kandidátov na lieky proti rakovine hrubého čreva. Výskumníci využívajú tieto bunky na hodnotenie cytotoxicity a účinnosti liekov, čo môže viesť k vývoju cielených liečebných prístupov. Napríklad v jednej štúdii sa pomocou bunkovej línie SW-620 skúmali protikolorektálne protinádorové účinky jednotlivých zložiek éterických olejov zo škorice a klinčeka [4].
- Štúdie metastázovania: Vzhľadom na vysoký metastatický potenciál sa bunky SW-620 dajú použiť na skúmanie molekulárnych dráh, ktoré sú základom metastázovania rakovinových buniek. Napríklad Zhou Yang a jeho kolegovia zistili úlohu génu Grainy-head-like 2 (GRHL2) v progresi a metastázovaní rakoviny hrubého čreva. Navrhli, že expresia génu GRHL2 inhibuje progresiu a metastázovanie kolorektálneho karcinómu prostredníctvom potlačenia epiteliálno-mezenchymálnej transformácie (EMT) [5].
Zabezpečte si bunkovú líniu SW620
Články o článkoch SW-620
V tejto časti sa zameriame na niektoré zaujímavé a najčastejšie citované vedecké publikácie týkajúce sa buniek SW-620.
Táto štúdia uverejnená v časopise Molecular Carcinogenesis (2017) navrhla, že liečba polyfenolom, urolitínom A, indukuje autofágiu v bunkovej línii kolorektálneho karcinómu SW620. Taktiež potláčala metastázovanie rakovinových buniek.
Tento článok v časopise Oncology Letters (2018) skúmal antimetastatický potenciál tetrandrínu, bis-benzylizochinolínového alkaloidu, s využitím buniek SW-620.
Tento článok bol uverejnený v časopise Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Navrhuje, že gén CDCA3 (Cell division cycle associated 3) je v bunkách kolorektálneho karcinómu nadmerne exprimovaný a podporuje ich proliferáciu prostredníctvom aktivácie signálnej dráhy NF-κB.
Štúdia uverejnená v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) skúmala synergický účinok bispecifického protilátka (ABL001) a chemoterapeutických liekov na progresiu nádoru v xenotransplantáte SW620.
Tento článok bol uverejnený v časopise Cells (2018). V ňom bol extrakt z Bacopa monnieri, Bacopaside II, skúmaný z hľadiska protinádorových účinkov na bunky SW-620 a iné bunky kolorektálneho karcinómu.
Zdroje týkajúce sa bunkovej línie SW-620: protokoly, videá a ďalšie informácie
Nižšie uvádzame niekoľko online zdrojov venovaných bunkám karcinómu hrubého čreva SW-620.
- Transfekcia buniek SW-620: Tento článok stručne opisuje protokol stabilnej transfekcie buniek línie SW-620.
Nasledujúci odkaz obsahuje protokol kultivácie buniek SW620.
- Protokol kultivácie buniek SW-620: Tento odkaz poskytuje základné informácie o bunkovej línii SW-620. Pomôže vám tiež zoznámiť sa s protokolom subkultivácie buniek SW-620 a manipuláciou s kryokonzervovanými a proliferujúcimi kultúrami SW-620.
- Protokoly kultivácie buniek: Toto video je skvelým zdrojom informácií o protokoloch pasážovania adhezívnych buniek, ich zmrazovania a rozmrazovania.
Často kladené otázky o bunkách SW620
Bunky SW620 sú bunky ľudského adenokarcinómu hrubého čreva získané z metastáz lymfatických uzlín pacienta s rakovinou hrubého čreva, preto sú dôležité pre výskum rakoviny.
Bunky SW620 majú vo všeobecnosti priemer od 15 do 30 mikrometrov, hoci sa môže líšiť v závislosti od podmienok kultivácie.
Bunky SW620 vykazujú niekoľko mutácií vrátane génu TP53. Tieto mutácie môžu ovplyvniť morfológiu buniek, čo vedie k rôznym tvarom a veľkostiam v rámci populácie.
Bunky SW620 a SW480 pochádzajú z adenokarcinómov hrubého čreva, ale bunky SW620 pochádzajú z metastatického ložiska, zatiaľ čo bunky SW480 pochádzajú z primárneho nádoru. Tento rozdiel môže ovplyvniť ich genetické zloženie, správanie v kultúre a odpoveď na liečbu.
Bunky SW620 sú dôležité pri štúdiu nádorového bujnenia, najmä vďaka ich schopnosti vytvárať nádory v xenotransplantačných modeloch myší a ich expresii markerov rakovinových kmeňových buniek, ako je CD133.
Áno, bunky SW620 sa používajú na štúdium dráh bunkovej smrti vrátane apoptózy a anoikis, ako reagujú na rôzne terapie rakoviny a podmienky prostredia.
Vysoký metastatický potenciál buniek SW620 a ich pôvod z metastatickej lymfatickej uzliny z nich robia vhodný model na štúdium šírenia rakoviny hrubého čreva.
Prietoková cytometria umožňuje výskumníkom analyzovať vlastnosti buniek SW620 vrátane expresie CD133 a rozsahu apoptózy alebo citlivosti na anoikis.
Bunky SW620 majú vysoký nádorový potenciál, keď sa zavedú do imunodeficientných xenotransplantačných modelov myší, čo ich robí cennými pre štúdie in vivo progresie rakoviny.
Referencie
- Siekmann, W., et al., Vplyv lidokaínu a ropivakaínu na primárne (SW480) a metastatické (SW620) bunkové línie rakoviny hrubého čreva. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395–401.
- Hewitt, R.E., et al., Validácia modelu progresie rakoviny hrubého čreva. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446–54.
- Thangaiyan, R., a kol., Podtypy mutácií génu KRAS výrazne ovplyvňujú citlivosť buniek kolorektálneho karcinómu na FL118, nový inhibítor survivínu, Mcl-1, XIAP, cIAP2 a MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
- Petrocelli, G., a kol., Molekuly prítomné v éterických olejoch rastlín na prevenciu a liečbu kolorektálneho karcinómu (CRC). Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
- Yang, Z., a kol., GRHL2 inhibuje progresiu a metastázovanie kolorektálneho karcinómu prostredníctvom potlačenia epiteliálno-mezenchymálnej transformácie. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195–1205.